【题目】回答下列 （一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入一些雪“陈泡菜汁”，这相当于加入了一些经过___________的发酵菌种；还可以采取用热水短时间浸泡蔬菜的手段，此项措施能缩短发酵时间的原因是___________________________________________________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由假丝酵母进行________________ 呼吸产生的。腌制过程需要控制时间、温度和食盐的用量。食盐过量会导致“咸而不酸”，原因是_____________。
（3）家庭制作泡菜过程并没有实行严格的无菌操作就能成功，请解释原因？_____________________________________ 。
（4）亚硝酸盐对人体有害，而它在泡菜的腌制过程中有先增后减的变化规律，所以需要测定其含量来确定泡菜的可食用时间，通常应用光电比色法进行亚硝酸盐的定量。泡菜样品处 理环节加硫酸锌是为了_____________________； 氢氧化钠用来________________；样品测定时加 60%乙酸创设了显色反应所需要的酸性环境；样品及亚硝酸盐标准溶液加显色剂后需要_____________________________25min， 使用相同光程的比色杯在 550nm 光波条件下测 OD 值。
（二）回答与基因工程和生物克隆有关的问题：
MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是 GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切点。图 3 表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图 4 表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。
（1）若要用如图 1 和图 2 中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构 建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用___________、DNA 连接酶和DNA 聚合酶等工具酶。
（2）图 3 中的转基因羊通常被称为生物反应器，它基于基因工程技术，将外援基因导入其基因组并_______________，生产价格低廉的蛋白质药物，具有光明的发展前景。导入受体细胞B 常用方法是_________， ④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C 首先使用Ca2+处理使其吸收周围的 DNA 分子，之后将细胞 C 与图中 M 溶于_________中，完成转化过程。
（3）图 4 中获得动物 1 的受体细胞通常是___________。根据图示操作步骤推测动物 2 与动物 3 的不同在于____________________________________。
（4）干细胞科技发展至今，已进入以脐带、胎盘等组织为主要干细胞来源的全新时代。目前国内干细胞临床研究超过半数采用脐带或胎盘干细胞。利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，临床上可以用于_____________________，从而挽救患者的生命。
【答案】扩大培养 破坏膜的选择透性，使细胞中营养物质外流供发酵菌种快速繁殖所用 厌氧 盐浓度过高使发酵菌种大量失水死亡，产有机酸减少 乳酸菌在短时间内大量繁殖，积累乳酸等代谢产物，抑制了大量不耐酸的杂菌生长 沉淀样品中的蛋白质 调节 PH 暗处静置/避光放置（“避光”或“暗处”是关键词） 限制酶 EcoRⅠ 定位表达于乳腺 农杆菌转化法 愈伤组织 缓冲液 受精卵 动物 2 是嵌合体（或写各器官基因型不完全相同），动物 3 是利用核移植技术培育的克隆动物 器官移植
【解析】
1、泡菜的制作及亚硝酸盐含量的测定原理：
（1）泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
（2）测定亚硝酸盐含量的原理：
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
2、分析题图：图1质粒中含有限制酶PstⅠ和EcoRⅠ的切割位点。
图2含目的基因的外源DNA中含有限制酶PstⅠ、MseⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中EcoRⅠ酶的切割位点位于目的基因中。
图3中表示通过不同途径获得转基因产品。
（一）（1）制作泡菜时加入一些“陈泡菜水”是为了提供乳酸菌菌种，这相当于加入了一些经过扩大培养的发酵菌种；热水可破坏膜的选择透性，使细胞中营养物质外流，供发酵菌种快速繁殖。所用还可以采取用热水短时间浸泡蔬菜的手段以缩短发酵时间。
（2）酵母菌无氧呼吸可产生酒精，所以醇类是由假丝酵母进行厌氧呼吸产生的。腌制过程中食盐过量会导致“咸而不酸”，原因是盐浓度过高使发酵菌种大量失水死亡，产有机酸减少。
（3）由于乳酸菌在短时间内大量繁殖，积累乳酸等代谢产物，抑制了大量不耐酸的杂菌生长，所以家庭制作泡菜过程并不需要实行严格的无菌操作就能成功。
（4）亚硝酸盐含量的测定过程中，泡菜样品处理环节加硫酸锌是为了沉淀样品中的蛋白质；氢氧化钠用来调节PH；样品及亚硝酸盐标准溶液加显色剂后需要暗处静置/避光放置25min，以排除光照对实验结果的影响，并使用相同光程的比色杯在550nm光波条件下测OD值。
（二）（1）含目的基因的外源DNA中含有限制酶PstⅠ、MseⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中EcoRⅠ酶的切割位点位于目的基因中，因此构建基因表达载体时，不能用EcoRⅠ酶切割，应该用限制酶PstⅠ、MseⅠ进行切割，则对质粒进行改造时，应该将限制酶EcoRⅠ的切割位点改造成限制酶MseⅠ的切割位点。因此，首先需要用限制酶EcoRⅠ切割，其次需要用DNA聚合酶将相应的脱氧核苷酸序列连接上去，最后再用DNA连接酶连接形成限制酶MseⅠ的切割位点。
（2）图3中的转基因羊通常被称为生物反应器，是将外援基因导入其基因组并定位表达于乳腺细胞中，生产价格低廉的蛋白质药物。培养转基因植物时，将目的基因导入受体细胞B常用方法是农杆菌转化法，④过程为植物组织培养过程，也可以培养到愈伤组织，再从培养液中提取。导入受体细胞C首先使用Ca2+处理使其形成感受态细胞，易于吸收周围的DNA分子，之后将细胞C与图中M溶于缓冲液中，完成转化过程。
（3）形成转基因动物，常将目的基因导入动物的受精卵细胞中，所以图4中获得动物1的受体细胞通常是受精卵。根据图示操作步骤可知动物2是嵌合体（或写各器官基因型不完全相同），动物3是利用核移植技术培育的克隆动物。
（4）利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，临床上可以用于器官移植，从而挽救患者的生命。
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【题目】“绿水青山就是金山银山”，某草原决定实施退耕还草措施，进行农业结构调整，走可持续农业道路。请回答下列问题：
（1）退耕还草后发生的演替类型是____，随着时间的推移，植物种类和数量越来越多，在垂直方向上具有明显的____现象。
（2）某科研人员欲调查退耕还草后某捕食瓢虫的种群密度，则其调查方法是____，调查时的关键是______________。
（3）退耕还草后该地分布着许多开花植物，为蜜蜂提供了“有食物”的信息，吸引蜜蜂前来采蜜并帮助植物传粉，这一现象说明信息传递能够___________。
（4）下图是退耕还草后部分食物网图。要构成一个完整的生态系统，除了图中所示生物外，还应有____________，图中蚜虫和木虱的关系是_______，若大叶苜蓿固定的能量是a J·hm-2·a-1，则捕食瓢虫最多获得的能量是____J·hm-2·a-1。
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【题目】野牛草是一种草坪绿化植物，幼苗生长缓慢。不同浓度的赤霉素（GA）溶液和生 长素（IAA）溶液对野牛草幼苗生长的影响，结果如下图。有关叙述不正确的是（ ）
A.本实验以蒸馏水处理为对照组
B.GA 对苗生长的促进效果比根的强
C.IAA 对根生长的促进效果强于 GA
D.实验结果证明 IAA 作用具有两重性
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【题目】为研究温度对某种酶活性的影响，设置甲（20℃）、乙（40℃）、丙（60℃）三个实验组，测定各组在不同反应时间内的产物浓度（其他条件相同），结果如下图所示。下列分析正确的是（ ）
A.该酶的最适温度在 20℃~40℃之间
B.在 T1 之后，丙组产物浓度不再增加的原因是底物耗尽
C.若改变反应体系的 pH，则图中三条曲线的变化趋势不变
D.在 T1 之前，若将丙组的温度降为 30℃，则三组产物浓度最终相同
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【题目】血糖是人体各组织细胞所需能量的主要来源，胰岛素对血糖的平衡发挥重要作用。图一为胰岛素降低血糖浓度的部分作用机理模式图（糖尿病病因之一是患者体内存在甲、乙、丙的异常抗体）。给人静脉注射不同剂量的胰岛素，测得血糖的补充速率和消耗速率如图二所示。下列分析 错误的是（ ）
A.胰岛β细胞分泌的胰岛素通过体液运送到肝细胞
B.曲线 b 的上升是胰岛素作用于肝脏、肌肉等细胞的结果
C.当胰岛素浓度为 40μU/mL 时，在较长时间内血糖浓度可维持相对稳定
D.体内出现丙的异常抗体的糖尿病患者无法通过注射胰岛素的方式取得疗效
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【题目】果醋的制作离不开优质醋酸菌的作用。某学者先将优质醋接种在含高酒精度的培养液中进行扩大培养，然后将扩大培养后的样液稀释并接种在含碳酸钙粉末的固体培养基上进行分离培养，最终分离得到耐高酒精度的醋酸菌优良品种。请回答：
（1）与醋酸菌的醋酸发酵相比，利用酵母菌制作果酒需要的环境条件是_____。
（2）对培养液、培养基进行灭菌常采用的方法是______，对接种器进行灭菌常采用的方法是________。
（3）在扩大培养时，液体培养液中酒精的作用是______。在分离培养时，对扩大培养后的样液进行梯度稀释，其目的是______。
（4）在分离培养时，醋酸菌的代谢产物能使碳酸钙分解，从而在醋酸菌菌落的周围会出现________，应选择________的菌落为目的菌。
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【题目】某实验小组探究一定浓度的萘乙酸（NAA）溶液和细胞分裂素（KT）溶液对棉花主根长度及侧根数的影响，所得结果如图所示。下列相关叙述或推理合理的是（ ）
A.由甲组数据可知，没有激素的调节棉花根也能生长
B.乙组与甲组和丙组可分别构成对比实验和对照实验
C.NAA和KT对棉花主根的顶端优势的作用有协同作用
D.若去除丁组棉花的主根，则棉花的侧根数可能会增多
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【题目】结合图分析，下列说法正确的是
A. 若细胞中含有结构①，则该细胞只能进行有氧呼吸
B. 不能仅依据细胞中是否含有结构②来判断其是否是植物细胞
C. 结构③是细胞遗传和代谢的中心，核糖体的形成与③内某些结构有关
D. 真核生物的细胞中都含有结构①和结构③
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【题目】科学家利用拟南芥野生型个体和突变体研究赤霉素和脱落酸的作用，实验处理及结果如下表所示（MS培养基是多数植物组织培养的基本培养基），下列相关叙述错误的是（ ）
实验材料 | 野生型个体 | 突变体 | ||||
实验处理 | MS培养基 | MS培养基+一定量赤霉素拮抗剂 | MS培养基+一定量脱落酸 | MS培养基 | MS培养基+一定量赤霉素 | MS培养基+一定量脱落酸 |
种子萌发与否 |
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A.突变体体内的赤霉素合成可能异常
B.种子萌发过程从根本上说是多种激素相互作用共同调节的过程
C.加入脱落酸后拟南芥种子不萌发主要是因为外源脱落酸的抑制作用
D.赤霉素和脱落酸在调节拟南芥种子萌发所起作用相反
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