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(8分)下图(一)为某基因工程中利用的质粒简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素(抗生素)抗性基因,tctR为四环素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图(二)为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题:

(1)在基因工程中常用的工具有三种:一是用作切取目的基因的             酶;二是将目的基因与运载体拼接的              酶;三是作为运载体的质粒。
(2)将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体(质粒)进行拼接形成重组DNA,理论上讲,重组DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-运载体和运载体-运载体三种,其中有效的(所需要的)重组DNA是                 ,因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
(3)利用图(一)所示的质粒拼接形成的3种拼接产物(重组DNA)导入无任何抗药性的原核宿主细胞,并接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物(重组DNA)是               。含有效的重组基因(目的基因-运载体)的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________(能/不能)生长。
(4)在动物基因工程中,将重组DNA导入受体细胞的常用方法         。
(5)图(二)中,作用于a 位置的酶是              ;作用于b 位置的酶是                 

(1)限制酶(限制性核酸内切酶)      DNA连接酶
(2)目的基因-运载体
(3)运载体-运载体    能
(4)显微注射法
(5)限制酶(限制性内切酶)     DNA解旋酶

解析

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相关习题

科目:高中生物 来源:2010年浙江省杭州学军中学高三上学期第一次月考生物试题 题型:综合题

(8分)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

 
已知
一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)
第一步水解
产物(单位bp)
第二步水解
产物(单位bp)
 
A切割酶
2100
将第一步水解分离后,分别用B酶切割
1900 200
1400
800  600
1000
1000
500
500
 
B酶切割
2500
将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割
1900 600
1300
800  500
1200
1000 200
经A酶和B酶同时切割
1900    1000    800     600    500    200
(1)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为         个和
       个。
(2)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

(3)已知BarnH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnH工和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后                       序列明显增多。

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科目:高中生物 来源: 题型:

为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

已知

一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对)

第一步水解

产物(单位bp)

第二步水解

产物(单位bp)

A切割酶

2100

将第一步水解分离后,分别用B酶切割

1900 200

1400

800  600

1000

1000

500

500

B酶切割

2500

将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割

1900 600

1300

800  500

1200

1000 200

经A酶和B酶同时切割

1900    1000    800     600    500    200

(1)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为    个和    个。

(2)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

(3)已知BarnH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnH工和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后                         序列明显增多。

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