Question

下图是基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题：

（1）通过A过程构建重组质粒时，需要两种工具酶是_______________和________________。其中能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使特定部位的两个脱氧梭苷酸之间的磷酸二酯键断开的是__________________。
(2)常用农杆菌转化法将抗虫基因导入棉花细胞，是因为其Ti质粒上具有__________，它能把目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上。
(3)棉花细胞经过E过程形成抗虫棉植株，E过程是利用_____________________技术完成的，其原理是_____________________。要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，还需要在个体水平上做抗虫实验。
(4)将目的基因导入植物细胞，除采用上图所示农杆菌转化法外，还可采用基因枪法和__________________。

Answer 1

（1）限制性核酸内切酶（限制酶）    DNA连接酶   限制性核酸内切酶（限制酶）
（2）T-DNA       （3）植物组织培养     植物细胞的全能性
（4）花粉管通道法

解析试题分析：（1）构建重组质粒时，需要用同种限制酶切割质粒和目的基因，再用DNA连接酶将两者连接成重组质粒。其中限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使特定部位的两个脱氧梭苷酸之间的磷酸二酯键断开。DNA连接酶只能连接片段之间的磷酸二酯键。
(2) Ti质粒上具有T-DNA，它容易把目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上。
(3)由于棉花细胞具有全能性，因此可利用植物组织培养培养成完整植株。
(4) 将目的基因导入植物细胞有三种方法：农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）；基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高；花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）
考点：基因工程
点评：本题考查了基因工程的工具酶及目的基因导入植物细胞有三种方法，属于对识记、理解层次的考查。具有一定的综合性。