Question

【题目】亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生 产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早 期胚胎发育的影响。分析回答：

①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分 别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO2 的培养箱中培养22～24h。

②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。

③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。

④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次 培养液，第 5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO2 的作用是____ 。

（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是__ 。步骤③中，判断是否受精的依据是____。

（3）步骤④中，受精卵经过_____时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是____。

（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L-1 时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起_____ 作用。

（5）本实验结果表明，__________的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据 是__________。

Answer 1

【答案】维持培养液 pH 的相对稳定 染色体的着丝点排列在赤道板上 在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体 卵裂期、桑椹胚 清除有害代谢产物，补充营养物质 促进 50μmol·L-1 核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高

【解析】

本题中涉及到动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养等动物细胞工程技术手段。体外受精所用的卵母细胞必须是培养到减数第二次分裂中期的细胞才是成熟的卵母细胞。早期胚胎发育过程为：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。

（1）步骤①是动物细胞培养的过程，细胞培养箱中加5%CO2 的作用是维持培养液pH的相对稳定。

（2）成熟的卵母细胞是培养到减数第二次分裂中期的细胞，减数第二次分裂中期的特征是染色体的着丝点排列在赤道板上；步骤③中判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否规察到两个极体。

（3）受精卵经过卵裂期、桑椹胚发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是清除有害代谢产物，补充营养物质。

（4）从表中数据可以看出，表格1和2中亚麻酸溶液为0μmolL-1的一组为对照组，与其相比，亚麻酸溶液为200μmolL-1时，核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，因此可知200μmol·L-1 时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用。

（5）根据表中数据，当核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高时所对应的亚麻酸的浓度为50μmol·L-1，此浓度对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利。