Question

7．通过人．改造能使某种DNA病毒失去自我繁殖能力，但其DNA还能成功整合到宿主细胞染色体上，从而达到使用病毒做载体治疗某些疾病的目的，下图表示用这种病毒做载体治疗白血病的过程．请分析回答：

（1）治疗过程用到的生物技术有转基因技术和细胞培养技术．
（2）人．工改造这种病毒载体时，通常要加装标记基因，该过程用到的酶是限制酶和DNA连接酶，标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因．灭活的病毒在细胞工程中一般用于诱导动物细胞融合．
（3）细胞培养过程中，细胞表面相互接触时会停止分裂，这种现象称为细胞的接触抑制．此时需要重新用酶处理，分瓶继续培养，这样的培养过程叫做传代培养．
（4）该图所示基因治疗的方式叫做体外基因治疗，这种治疗方法不能（能、不能）解决后代遗传问题．
（5）鉴定目的基因是否整合到细胞染色体上的方法是DNA分子杂交，若出现杂交带，则表明已经成功整合．

Answer 1

分析 基因治疗是将目的基因通过载体导入患者受体细胞形成重组受体细胞，体外培养后再输回患者体内，或将目的基因通过载体直接送入患者体内．前者为体外途径，后者为体内途径．
进行基因检测有两个必要条件，一是必需的特异的DNA探针；二是必需的基因组DNA．当两者都变性呈单链状态时，就能进行分子杂交．

解答 解：（1）该基因治疗过程中需对病毒载体进行基因改造并整合到人体DNA上，并在体外培养造血干细胞，故用到的生物技术有 转基因技术  和 细胞培养技术．
（2）该病毒作为载体时，通常要加装标记基因，故需对DNA进行切割和重新连接，故该过程用到的酶是限制酶和DNA连接酶，标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因．动物细胞融合中常用灭活的病毒作为诱导剂．
（3）动物细胞在培养瓶中分裂生长，随着细胞的增多，细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制；因此需要定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁脱离下来，以便于分装到更多的培养瓶中继续培养，这样的培养过程叫做传代培养．
（4）该图所示基因治疗的方式叫做体外基因治疗，由于该方法只是改造了造血干细胞的基因，而生殖细胞遗传物质未改变，故这种治疗方法不能解决后代遗传问题．
（5）鉴定目的基因是否整合到细胞染色体上的方法是DNA分子杂交技术，通过和特定的分子探针杂交后，若出现杂交带，则表明已经成功整合．
故答案为：
（1）转基因技术  细胞培养技术 
（2）限制酶  DNA连接酶  鉴别受体细胞中是否含有目的基因  诱导动物细胞融合 
（3）接触抑制  传代培养 
（4）体外基因治疗  不能 
（5）DNA分子杂交  杂交带

点评 本题考查了基因工程应用的相关知识，属于对识记、理解层次的考查，考生既要清楚基因诊断和基因治疗的概念，又要区分二者的区别，可通过列表归类比较．