[题目]硝基苯酚是工业污水中的重要污染物.某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌.请回答下列有关问题:(1)为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌.在配制培养基时应选择 (填“硝基苯酚 “硝基苯酚+牛肉膏或“硝基苯酚 +葡萄糖)作为碳源.不采用其他两组的原因是 .(2)纯化菌株时.通常使用的划线工具是 .划线的某个平板培养� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】硝基苯酚是工业污水中的重要污染物，某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题：

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配制培养基时应选择_________（填“硝基苯酚”“硝基苯酚+牛肉膏”或“硝基苯酚”+葡萄糖）作为碳源，不采用其他两组的原因是 __________________________________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是_________________________。

（3）进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入________mL的无菌水中；常用________法接种进行活菌计数，其原理是_____________________________ ，但统计的菌落数往往____（填“多于”或“少于”）稀释液中的活菌数，原因是________________。

（4）实验数据显示，当培养基中加入碳源葡萄糖时，该细菌降解速率明显提高，原因可能是_____________________________________________。

【答案】硝基苯酚其他两组分别含有其他氮源和碳源，不能保证硝基苯酚是唯一碳源和氮源接种环接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始 9 稀释涂布平板当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于一个活菌少于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；有些活菌在培养过程中死亡葡萄糖为细菌提供充足的能源，使细菌代谢繁殖加快

【解析】

微生物生长繁殖所必需的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，根据题意，欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌，则需配制以硝基苯酚为唯一碳源的培养基；接种时常用接种环，平板划线法要求灼热的接种环冷却后再划线，否则会灼伤菌株甚至导致死亡。划线时要从上一次划线的末端开始划线，这样接种环上才有菌株。

（1）为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌，在配制培养基时应选择硝基苯酚作为碳源，不采用其他两组的原因是其他两组分别含有其他碳源和氮源,不能保证硝基苯酚是唯一碳源和氮源。

（2）利用划线分离法纯化菌株时使用的划线工具是接种环；划线的某个平板经培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落，造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却或者划线未从第一区域末端开始。

（3）进行梯度稀释时，需要将ImL菌液移入盛有9mL的无菌水中；稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数，其原理是培养基表面的一个菌落来源于稀释液中的一个活菌；由于菌落可能是由两个或多个细胞形成或者操作时有些活菌在培养过程中死亡，或有些活菌在培养过程中死亡，所以统计的菌落数往往少于稀释液中的活菌数。

(4)当培养基中加入碳源葡萄糖时，该细菌降解速率明显提高，因为此时能源充足，细菌代谢繁殖加快。

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实验组	实验一					实验二
编号	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
蔗糖酶浓度	0%	1%	2%	4%	5%	2%	2%	2%	2%	2%
蔗糖浓度	10%	10%	10%	10%	10%	0%	5%	10%	20%	30%
相对反应速率	0	25	50	100	200	0	25	50	65	65

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D. 实验二中，蔗糖浓度高于20%后限制反应速率的因素是酶浓度

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实验条件	水分的消耗量（mL）	Ca2+（%）	K+（%）	Mg2+（%）
甲组	1070	128	27	184
乙组	425	103	35	115

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（2）从吸收离子的比例上看，大麦幼苗吸收各种离子的速率是不同的，造成这种结果的原因主要与细胞膜上运输相关离子的____________有关，镁离子和钙离子的浓度实验结束时比实验开始时浓度还高，原因是__________________________________________________________________。物质的跨膜运输都与细胞膜的________这一结构特性有关。

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请用溶液培养法设计实验，验证玉米中的镁是可重复利用的元素。写出实验思路并预期结果。

实验思路：_____________________________________.

预期结果:__________________________________________________________________________.

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