Question

“金色大米”由于含有可以生成维生素A的β一胡萝卜素．它呈现金黄色泽，故称“金色大米”．“金色大米”的培育流程如图所示．请回答下列问题．（已知酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓ GATCC一．酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓ GATC-）．

（1）培育“金色大米”的基因工程操作中，d过程最常用的方法是

 

；图中c的构成除了复制原点、目的基因、标记基因外，还必须有

 

、

 

等．
（2）据图分析，在构建c的过程中，目的基因用

 

（限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ）进行了切割．该酶切割后形成的粘性末端写作

 

．
（3）过程e运用了细胞工程中的

 

技术；在目的基因的制备过程中，之所以要进行a、b过程，而不在a过程的模板DNA上直接切取目的基因，是因为

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图解：图中a表示转录过程，b表示利用mRNA进行逆转录合成目的基因，c表示基因表达载体的构建，d表示目的基因导入受体细胞，e是水稻细胞进行植物的组织培养并筛选出符合要求的植株．
目的基因的两侧分别有-GGATCC-、-GATC-两种序列，根据两种酶的酶切位点，限制酶Ⅰ只能切割左侧的序列，而限制酶Ⅱ可以切割两侧的序列．

解答： 解：（1）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法；基因表达载的构成除了复制原点、目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因等．
（2）由图可知，目的基因的两侧有-GGATCC-、-GATC-两种序列，由于酶I的识别序列和切点是一G↓GATCC一，酶II的识别序列和切点是一↓GATC-，因此只能选择限制酶Ⅱ获取目的基因，该酶切割后形成的黏性末端是．
（3）将转基因受体细胞培育成转基因植株还需要采用植物组织培养技术；在目的基因的制备过程中，之所以要进行a、b过程，而不在a过程的模板DNA上直接切取目的基因，是因为目的基因片段中含有内含子．
故答案为：
（1）农杆菌转化法    启动子   终止子
（2）限制酶Ⅱ
（3）植物组织培养    目的基因片段中含有内含子

点评：本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息和所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．