【题目】为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用 技术从陆地棉基因文库中获取酶
D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，所含三种限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切
点如下图所示。则用 和 酶处理两个基因后，可得到 端与
端（填图中字母）相连的融合基因。
（2）将上述融合基因插入右上图所示Ti质粒的T-DNA中，构建 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含 的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是 。
（4）进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过 技术，可培育成转基因油菜植株。用 法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。
【答案】（1）PCR ClaⅠ DNA连接 A D
（2）基因表达载体（或“重组质粒”） 四环素
（3）利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞 植物组织培养
（4）抗原—抗体杂交
【解析】（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因．
（2）将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液．
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜．
（4）用抗原-抗体杂交法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达．
名校课堂系列答案科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】如下图所示，请据图回答下面的问题。
(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能 “融合”在一起，说明细胞膜[__________________________。此过程，常用__________________作为诱导剂，该细胞的特点是___________________________________________。
(2)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同
_____________________________________________________________________。
(3)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了______________________________________________。
(4)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的__________________和__________________两大技术。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下列叙述不符合“形态结构与功能相适应”生物学观点的是
A．根尖成熟区表皮细胞具有中央大液泡，有利于水分的吸收
B．内质网膜可与核膜、细胞膜相连，有利于细胞内物质的运输
C．神经元的突触小体内含有较多线粒体，有利于神经递质的释放
D．卵细狍体积较大，有利于提高与周围环境进行物质交换的效率
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】生物试卷）对动物细胞某种细胞器的组成成分进行分析，发现它含有A、T、G、C、U5种碱基．主要由该细胞器完成的生理活动是（ ）
A．CO2+H2O→（CH2O）+O2
B．C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量
C．C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量
D．DNA→RNA→蛋白质
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】下图所示以DNA为模板转录RNA的过程图解，图中4、5表示两种功能不同的酶。请根据图分析回答下面的问题：
（1）在玉米的叶肉细胞，则能够进行该生理过程的细胞结构有___________。
（2）转录过程中DNA首先在[ ]__________的催化作用下，由________提供能量，将DNA分子中碱基对内的____________断开，该过程称为________________。
（3）然后在［ ］_________的催化作用下，以其中的________链作为信息模板，以［ ］_________为原料，合成出[ ]___________。
（4）通过转录，DNA分子中的遗传信息被准确地转移到_______________中。
（5）在真核细胞的细胞核中，转录的产物通过_______进入细胞质中，与________结合在一起直接指导蛋白质的生物合成过程。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图分析并回答下列问题：
（1）形成的PG反义质粒叫做_______________，它的构建过程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_____________。若已获取PG的mRNA，可通过________ 获取PG基因。
（2）重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是 ，要实现此目的，还可以用_________法。
（3）要获取番茄的原生质体，通常要用到 酶。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有 的培养基进行筛选。将其置于质量分数约为0．3g/ml的蔗糖溶液中，观察细胞的 现象来鉴别细胞壁是否再生。
（4）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与 （“①天然的PG基因/②天然的PG基因转录的mRNA”填序号）互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若观察到番茄果实的保质期__________，则可确定转基因番茄培育成功。
（5）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，还需要用 技术；其中，愈伤组织经__________形成完整植株。
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科目：高中生物 来源： 题型：
【题目】
（1）用一定浓度的X溶液处理临时装片A，得到如图C所示的结果，据图判断物质X进入细胞的方式应该为 。
（2）据图C推测在整个实验过程中，图B所示细胞发生的形态变化是 。发生这些变化的条件为：
①植物细胞的 相当于一层半透膜，② 之间存在浓度差。
（3）为了更好地观察植物细胞失水和吸水过程，通常选择紫色洋葱外表皮细胞作为材料，原因是 。
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