Question

请回答下列有关生物技术实践的问题．
（1）为了从土壤中筛选能有效降解一种有害的、难于降解的有机化合物A的细菌．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目地菌），该培养基为

 

培养基，其中化合A为目的菌提供

 

 等营养要素，在分离、纯化、计数过程中，则常采用

 

 法接种，实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是

 

，如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中形成的菌落如图所示，造成这种结果的原因可能是

 

．
（2）在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高且

 

 等特点，在鉴定胡萝卜素粗品时，常用

 

 法，如果标准样品只形成一种色素带，而提取样品形成了多种色素带，其原因可能是

 

．
（3）用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用

 

 洗涤红细胞，用

 

 破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会

 

，降低分离效果．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,从生物材料中提取某些特定成分,蛋白质的提取和分离

专题：

分析：（1）实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长．
（2）常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）胡萝卜素的化学性质稳定，为橘黄色结晶，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等脂溶性有机溶剂，常采用萃取法提取．胡萝卜素的提取流程为：红萝卜-粉碎-干燥-萃取-过滤-浓缩-胡萝卜素-鉴定．
（4）凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快．

解答： 解：（1）由于用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目地菌），所以该培养基为选择培养基．由于微生物的生长需要水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，所以化合A为目的菌提供碳源和氮源等营养要素．在分离、纯化、计数过程中，则常采用稀释涂布法接种．实验过程中还需配制空白培养基作为对照，其目的是验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格，如果空白培养基中无菌落形成而实验组培养基中形成的菌落如图所示，造成这种结果的原因可能是土壤中含有4种能降解有机化合物A的细菌或培养基不纯，含有其他碳源和氮源或接种过程中被杂菌污染．
（2）在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有沸点高且水不溶性或不与水混溶等特点，在鉴定胡萝卜素粗品时，常用纸层析法，如果标准样品只形成一种色素带，而提取样品形成了多种色素带，其原因可能是提取样品中含多种胡萝卜素．
（3）用凝胶色谱法提取分离血红蛋白时，用生理盐水洗涤红细胞，用蒸馏水和甲苯破裂红细胞使血红蛋白得以释放，如果装填的凝胶色谱柱中出现气泡，气泡会搅乱洗脱次序，降低分离效果．
故答案为：
（1）选择    碳源和氮源      稀释涂布法     验证培养基灭菌是否彻底或检测培养基平板灭菌是否合格     土壤中含有4种能降解有机化合物A的细菌或培养基不纯，含有其他碳源和氮源或接种过程中被杂菌污染
（2）水不溶性或不与水混溶    纸层析    提取样品中含多种胡萝卜素
（3）生理盐水    蒸馏水和甲苯     搅乱洗脱次序

点评：本题综合考查细菌的筛选、胡萝卜素的提取和提取分离血红蛋白等相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．