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    7．2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书．下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

    （1）④过程应用的主要生物技术是植物组织培养；该技术的过程主要包括脱分化和再分化两个阶段，利用的基本原理是植物细胞的全能型．
    （2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的蛋白质，这属于蛋白质工程技术范畴．
    （3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．如图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：

    ①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入启动子．
    ②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的tms和tar（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于目的基因准确插入．第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等．
    ③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是在含卡那霉素的培养基能够生长，在含四环素的培养基上不能生长．
    （4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC．

    分析 分析图解：图中①表示基因表达载体的构建，②表示重组质粒导入土壤农杆菌，③表示土壤农杆菌感染水稻细胞，④表示利用植物组织培养技术培养转基因植物．
    基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子．
    标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．
    启动子是一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质．

    解答 解：（1））④过程应用的主要生物技术是植物组织培养；该技术的过程主要包括脱分化和再分化，两个阶段，利用的基本原理是植物细胞的全能性．
    （2）蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种心的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于蛋白质工程．
    （3）①启动子是一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质．
    ②图中看出，tms基因能够编码生长素，tmr基因能够编码细胞分裂素，这两种激素能够促进植物的生长．因此人工改造时用限制酶Ⅰ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的tmr、tms，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；另外只有一个插入位点，也有利于目的基因（或外源DNA）准确插入．
    ③若用限制酶Ⅱ切割改造过的理想质粒，质粒上的抗四环素的标记基因（tet）就会破坏，所以以含四环素和卡那霉素的培养基培养后，在含卡那霉素的培养基能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长．
    （4））若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC．
    故答案为：
    （1）植物组织培养  脱分化  再分化  植物细胞的全能性
    （2）蛋白质
    （3）①启动子  ②tms和tar   目的基因准确插入   ③在含卡那霉素的培养基能够生长，在含四环素的培养基上不能生长
    （4）GACGTC

    点评 本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生析图能力和理解能力，并能够运用所学知识与观点做出合理的判断或得出正确的结论的能力，难度适中．考生要能够识记基因工程中的工具酶、基因表达载体的组成；在分析图解时找准限制酶切割位点；掌握目的基因检测与鉴定的方面并进行运用．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    （2015•琼海校级模拟）图中甲表示不同浓度的生长素对芽生长的影响，乙表示植物的芽在不同浓度的生长素溶液中的生长情况，图中c点所对应的生长状况最有可能是（ ）

    A．① B．② C．③ D．④

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    （2015秋•丰城市校级月考）应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品．请据图回答下列问题：

    （1）在培育转人生长激素基因牛过程中，②过程常用的方法是 ，采用 技术可以获得多头基因型相同的转基因牛．

    （2）转人生长激素基因牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，在构建基因表达载体时，人生长激素基因的首端必须含有 ．

    （3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅲ代表的细胞具有 的特点．

    （4）在抗虫棉培育过程中，④过程常采用的方法是 ；⑤过程采用的技术是 ；在分子水平上可采用 方法来检测转基因抗虫棉的抗虫基因是否成功表达．

    （5）下面是获取目的基因的几种方法，其中需要模板的是 ．

    ①从基因组文库中获取目的基因

    ②利用PCR技术扩增目的基因

    ③构建cDNA文库

    ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因

    A．①② B．②③ C．①③ D．①④

    （6）当获能后的精子与卵子相遇时，首先发生 ，释放出有关的酶直接溶解卵丘细胞间的物质，形成精子穿越放射冠的通路．防止多精入卵的生理反应依次有透明带反应、 ．

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    （2014•禹州市一模）如图为细胞核结构模式图，下列有关叙述不正确的是（ ）

    A．①在细胞分裂的不同时期呈现不同状态，对其染色可用改良苯酚品红染液

    B．②与核糖体的形成及某种RNA合成有关

    C．③为单层膜，其主要成分是磷脂和蛋白质

    D．蛋白质和RNA等大分子物质通过核膜上的核孔需要消耗能量

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    2．胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法．利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向诱导人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）分化成胰岛B细胞．请回答下列问题：

    （1）取人羊膜组织刮除血块、上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用胰蛋白酶处理，去除细胞表面（糖）蛋白，使细胞分散开，最终制成hAMSCs悬液．将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养，先后出现细胞贴壁生长、接触抑制现象象，直至细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养．
    （2）取传至第3代的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE进行诱导分化培养．该代hAMSCs能保持细胞正常的（二倍体）核型．诱导分化培养15天后，提取细胞的RNA（或mRNA），用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞．
    （3）用人的杂交瘤细胞来生产人源单克隆抗体难以成功，因此单克隆抗体大都来自鼠源．但鼠源单抗在人体内使用，会产生较强的免疫原性，为解决这一问题，发明了嵌合抗体．大致过程如图所示，嵌合抗体能降低鼠源抗体的免疫原性，从图中可以推测，免疫原性的产生主要与抗体的C（选填“V区”、“C区”）有关．构建的人鼠嵌合抗体基因表达载体除了标记基因和目的基因外，还有启动子、终止子．
    （4）科学家们用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用”的结构基因．他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成杂交瘤细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞．这些细胞既保持了合成大鼠肝细胞3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠干细胞的这3种蛋白，但是在正常的小鼠成纤维细胞中从不合成这些．由此可见，融合实验证明了小鼠成纤维细胞含有不表达的但肝细胞专一表达的基因，在特定条件下这些“闲置基因”也可表达．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    12．如图所示某遗传病的家系谱，请据图回答：
    （1）该病属隐性遗传病．
    （2）若该病为白化病则：（相关基因用A和a表示）
    ①Ⅲ8的基因型为aa；
    ②Ⅲ9为纯合体的概率为$\frac{1}{3}$
    （3）若该病为红绿色盲病则：（相关基因用B和b表示）
    ①Ⅰ4的基因型为XBXb；
    ②Ⅲ7为纯合体的概率为$\frac{1}{2}$
    （4）若Ⅲ8同时患有色盲和白化病，则Ⅱ6基因型为AaXBXb．Ⅲ10为色盲男孩的概率为$\frac{1}{4}$．

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    科目：高中生物 来源： 题型：多选题

    19．如图为某伴性遗传病的系谱图，其中有关判断不正确的是（　　）
    A．该遗传病为隐性性状
    B．Ⅱ-3和Ⅱ-4的基因型不同
    C．Ⅱ-3表现正常，不携带致病基因
    D．Ⅰ-1和Ⅰ-2的子女中，儿子患病的概率为50%

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    16．下列对四分体的叙述正确的是（　　）
    A．一条染色体含有4个DNA分子B．一个细胞中含有4对同源染色体
    C．一个细胞中含有4条染色单体D．一对同源染色体含有4条染色单体

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    16．根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图回答问题：

    （1）图甲所示装置可用于提取玫瑰精油（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）．
    （2）制作果酒时可选用图乙的装置．为适当提高果酒的生产速率，进气口应先打开后关闭，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是既可以放气，又可防止污染．
    （3）图丙为樱桃果酒生产工艺流程简图．樱桃榨汁前需要除去果柄，此操作是在冲洗之后（填“前”或“后”）进行的；为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的果胶（多答“纤维素酶”不扣分）酶．
    （4）从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和碳源、氮源．樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用重铬酸钾溶液来鉴定．在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能（填“能”或“不能”）将果汁中的糖发酵成醋酸．

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