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    16．炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病．对炭疽病疑似患者，可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌．

    （1）若要从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，可将患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用无菌玻璃刮刀涂匀，该接种方法称为涂布分离法．乙图所示的四种菌落分布图中，该接种方法不能得到的是D．
    （2）制备甲图中的液体培养基时需采取高压蒸汽灭菌法灭菌．接种可疑菌后，需将三角瓶置于35℃下的摇床上振荡培养24小时，可疑菌会大量繁殖，液体培养基变浑浊．
    （3）甲图中，对照组与实验组试管同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（高/低），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．此判断的依据是噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降．

    分析 1、微生物常见的接种的方法
    ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
    ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
    2、实验室常用的灭菌方法
    ①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
    ②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
    ③高压蒸汽灭菌：培养基一般采用该方法进行灭菌．

    解答 解：（1）根据题干信息可知，“用无菌玻璃刮刀涂匀”，表明该接种方法为稀释涂布平板法，即为涂布分离法．分析乙图可知，图中ABC三个平板中菌落均均匀分布，只是菌落数不同，采用的是稀释涂布平板法，而D平板运用了平板划线法．
    （2）培养基一般采取高压蒸汽灭菌法灭菌．接种可疑菌后，需将三角瓶置于35℃下的摇床上振荡培养24小时，可疑菌会大量繁殖，液体培养基变浑浊．
    （3）甲图中，实验组中加入噬菌体液，由于噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降，如果实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．
    故答案为：
    （1）涂布分离法      D
    （2）高压蒸汽灭菌     振荡
    （3）低    噬菌体侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌数量下降

    点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生掌握微生物分离和纯化的两种方法，掌握无菌技术的主要内容，能够运用噬菌体专一性的侵染细菌的知识储备解决疑似患者是否被炭疽杆菌感染．

    练习册系列答案
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