Question

人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选．利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示．

（1）进行转基因操作前，需用

 

酶短时处理大鼠组织，以便获得单个细胞．
（2）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠

 

中获取．
（3）图中的高血压相关基因作为

 

，质粒作为

 

，二者需用

 

切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有

 

有关．
（4）子代大鼠如果

 

和

 

，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型．
（5）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是

 

、早期胚胎培养和胚胎移植．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：1．卵母细胞的采集和培养
主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精；第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵．采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精．
2．作为运载体必须具备的条件：
①能在受体细胞中复制并稳定保存．②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．
3．目的基因的检测与鉴定，基因探针--用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段．
1）分子水平上的检测
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．（例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．）

解答： 解：（1）进行转基因操作前，需用胰蛋白酶短时处理大鼠组织，以便获得单个细胞．
（2）卵母细胞的采集和培养，主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精．第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵．
（3）本实验是制备遗传性高血压转基因模型大鼠，高血压相关基因与质粒分别作为目的基因与载体．质粒具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．
（4）检测目的基因是否翻译成蛋白质或个体水平上的鉴定是否具有目的基因的相关的现状，说明高血压相关基因以成功表达．
（5）由图可知，在这技术上所用到的主要胚胎工程技术是体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植．
故答案为：
（1）胰蛋白酶
（2）卵巢
（3）目的基因    载体  限制酶   限制酶切割位点
（4）检测到体内有相关蛋白   出现高血压
（5）体外受精

点评：本题考查了基因工程、胚胎工程的相关内容，意在考查学生理解所学知识的要点，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用．