Question

1．某研究小组欲从土壤中分离能分解石油的微生物，用于因渔船漏油造成的海水污染的处理．回答下列问题：
（1）从土壤中分离能分解石油的微生物A时，宜用石油作为培养基中的唯一碳源，该培养基中需要加入凝固剂，从物理状态上讲，这种培养基属于固体培养基．将微生物A接种到该培养基时，宜采用灼烧方法对接种环进行灭菌．
（2）培养基制备流程包括：计算、称量、溶化、灭菌和倒平板．在倒平板的过程中，如果不小心将培养液溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板不能（填“能”或“不能”）用来培养微生物A．
（3）采用平板划线法分离土壤浸出液中微生物A时，在第二次及后面划线时，总是从上一次划线的末端开始划线．这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（4）欲利用稀释涂布平板法检测土壤浸出液中微生物A含量，需先将1mL土壤浸出液稀释100倍，再吸取0.1mL稀释样液涂布在3个平板上；在适宜的条件下培养一段时间后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升土壤浸出液中所含有的活微生物A的数量为3.8×10⁷个．

Answer 1

分析 在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油．应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤．

解答 解：（1）从土壤中分离能分解石油的微生物A时，应选用石油作为唯一碳源的选择培养基进行培养、分离．由于该培养基中加入了凝固剂，因此该培养基为固体培养基．对接种环等金属器具宜采用灼烧的方法进行灭菌．
（2）倒平板之前需要先进行灭菌．在倒平板的过程中，如果不小心将培养液溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板不能用来培养微生物A，这样在培养的过程中易被杂菌污染．
（3）平板划线法分离土壤浸出液中微生物A时，在第二次及后面划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
（4）0.1 mL稀释样液中平均有38个活菌，可推测每升土壤浸出液中的活菌数=38×10×100×1 000=3.8×10⁷个．
故答案为：
（1）石油　固体培养基　灼烧
（2）灭菌　不能
（3）将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（4）3.8×10⁷

点评 本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握．