Question

【题目】如图1所示是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌”示意图．所用的运载体为质粒A，生长素合成基因为B，a为目的基因于质粒A的结合部位．（已知细菌D细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌后，基因能得到表达）

（1）图1中A和B产生的C叫_____，它通过在体外完成，此过程必须用到的工具酶为DNA限制性核酸内切酶和_____．除了细菌以外，理论上能够接纳C的受体细胞还可以是_____。

（2）若质粒A模板链中的AGT序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是_____．一般而言，一个核糖体最多可同时容纳_____分子的tRNA。

（3）限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是﹣C↓AATTG﹣和﹣G↓AATTC﹣．如图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指部位为限制酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因．不适合作为如图2所示的目的基因载体的质粒是[_____]。

（4）如图3所示能正确反映目的基因转录产物内部结构的是_____。

TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子。

Answer 1

【答案】重组质粒 DNA连接酶 酵母菌等 AGU 2（或3） BCD B

【解析】

分析图1：图1表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶。
分析图2：图2中，限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-。
分析图3：TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子。

（1）图1表示基因表达载体的构建过程，其中A（质粒）和B重组产生的C叫重组质粒；该过程需要先用限制性核酸内切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．除了细菌以外，酵母菌等也能够作为接纳C的受体细胞。
（2）质粒A模板链中碱基为AGT，则mRNA中对应的密码子为UCA，tRNA上中的反密码子为AGU．在翻译的过程中，一个核糖体一般可以容纳两个tRNA携带氨基酸进入核糖体与mRNA进行互补配对，使得两个氨基酸之间脱水缩合形成肽键，最多不会超过2（或3）个。
（3）A、A中含有标记基因，且限制酶切割后不会破坏标记基因，A正确；
B、B中不含标记基因，不便于之后的筛选过程，B错误；
C、C中含有标记基因，但用限制酶切割后会破坏标记基因，C错误；
D、D中含有标记基因，但用限制酶切割后会破坏标记基因，D错误。
故选BCD。
（4）基因转录产物为mRNA，因此转录起始位点（TSS）和终止位点（TTS）应在mRNA两端；作为起始密码子（STC）应在转录起始位点之后，终止密码子（SPC）应在转录终止位点之前，这样才能保证翻译的正常开始和终止。
故选B。