【题目】随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因测序工作的完成,人类跨入了蛋白质时代。对蛋白质进行研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题:
(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、_____、_____和纯度鉴定。
(2)凝胶色谱法:是根据_______________的有效方法.所用凝胶的化学本质大多为____________。SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳消除了净电荷对迁移率的影响,使电泳迁移率完全取决于_____。
(3)粗分离中透析的目的是________,若要尽快达到理想的透析效果,可以_______。
(4)装填凝胶色谱柱时,凝胶必须装填紧密,原因是_____________________,色谱柱制作成功的标志是__________________。
【答案】粗分离 纯化 相对分子质量的大小分离蛋白质 多糖类化合物 分子的大小 去除相对分子质量较小的杂质 及时更换缓冲液或增加缓冲液的量 如果凝胶装填得不够紧密、均匀,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动次序,影响分离的效果 红色区带均匀一致的移动
【解析】
血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品的处理;再经过透析去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
(1)血红蛋白的提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
(2)样品纯化是通过凝胶色谱法(分配色谱法)去掉分子量较大的杂质。凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快。
(3)血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析,即将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析,去掉分子量较小的杂质,原理是小分子杂质可以通过透析袋进入缓冲液中,血红蛋白分子量较大,不能通过透析袋进入缓冲溶液。若要尽快达到理想的透析效果,可以及时更换缓冲液或增加缓冲液的量。
(4)如果凝胶装填得不够紧密、均匀,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流动次序,影响分离的效果,因此,装填凝胶色谱柱时,凝胶必须装填紧密。色谱柱制作成功的标志是:红色区带均匀一致的移动。
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【题目】前不久,某生物公司的百白破疫苗检验不符合规定。为生产高效价疫苗和简化计划免疫程序,科学家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四联疫苗,经各项检测均通过 rHB-DTP四联疫苗制检规程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风杆菌的四种类毒素。请分析回答:
(1)为获取百日咳杆菌类毒素的基因,可从百日咳杆菌的细胞中提取对应mRNA,在______的作用下合成双链 cDNA片段,获得的 cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列_____(填“相同”或“不同”)。
(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小,且序列已知,获得目的基因可采用________,然后通过 PCR技术大量扩增,此技术的前提是已知________________________________。
(3)把目的基因导入受体细胞时,科学家采用了改造后的腺病毒作为载体,写出你认为科学家选它的理由_________________________________________________。(写出 2点)
(4)研究发现,如果将白喉杆菌类毒素 20位和 24位的氨基酸改变为半胱氨酸,免疫效果更好,请写出此种技术的基本流程_____________________________________。
(5)实验证明,一定时间内间隔注射该疫苗 3次效果更好,其主要原因是体内产生的_____细胞数量增多,当同种抗原再次侵入人体时二次免疫的特点是_____。
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【题目】下列关于细胞生命历程中分化、衰老、凋亡、癌变的叙述,错误的是
A.细胞分化、衰老和癌变都会导致细胞形态、结构和功能发生变化
B.细胞分化使细胞功能趋向专门化,主要原因是遗传物质发生了改变
C.被HIV侵染的细胞被清除属于细胞凋亡
D.衰老的细胞体积变小,核体积变大,代谢减弱
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【题目】某学生用徒手切片法制作花生子叶切片,用苏丹Ⅲ染液染色后,在显微镜下观察。在高倍镜下转动细准焦螺旋,有一部分细胞看得比较清晰,而另一部分细胞比较模糊,其原因最可能是
A.细准焦螺旋没有调节好B.反光镜未调节好
C.物镜被损坏D.子叶切片切得厚薄不均
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【题目】磁性壳聚糖微球是一种新型高分子材料,可用于酶的固定化。它表面的氨基可以与蛋白质分子的羧基反应,从而将蛋白质分子吸附固定,因此利用它固定酶的方法是( )
A. 化学结合法B. 交联法C. 网格法D. 包埋法
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【题目】蛋白质和核酸是生物体内普遍存在的大分子物质,下列有关蛋白质和核酸结构和功能的说法正确的是
A.有些蛋白质具有运输功能,比如胰岛素和血红蛋白
B.蛋白质和核酸两种生物大分子都以碳链为基本骨架
C.核苷酸是遗传信息的主要携带者
D.原核细胞含有染色体、RNA和蛋白质
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【题目】人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大,目前通常利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白,下列操作错误的是
A.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子,通过体外受精,形成受精卵
B.将人血清白蛋白基因通过显微注射技术直接导入奶牛受精卵,形成重组细胞
C.体外培养重组细胞,促使其形成早期胚胎
D.选择雌性胚胎移植到受体母牛体内,最终发育成转基因小牛
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【题目】下列关于细胞的物质组成、结构和功能的描述正确的是
①氨基酸脱水缩合形成蛋白质时,产生的水分子的H全部来自于氨基
②原核细胞中同时含DNA和RNA,但只有DNA是遗传物质
③动物细胞的主要能源物质是糖类,植物细胞的主要能源物质是脂肪
④溶酶体内含有多种水解酶,能分解衰老、损伤的细胞器
⑤动物细胞中的中心体与有丝分裂有关
⑥原核细胞与真核细胞的细胞膜的组成成分基本相同,细菌和酵母菌细胞最明显的区别在于有无核膜。
A.①③④⑤B.①③⑤⑥C.②③⑤⑥D.②④⑤⑥
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【题目】利用脊蛙(无头蛙)进行反射实验,其实验思路如下:
①用稀硫酸刺激脊蛙皮肤完好的趾尖,脊蛙出现正常反射;
②将含有一定浓度的可使神经麻醉的可卡因棉球,放在该脊蛙的坐骨神经处,过一会用稀硫酸刺激皮肤完好的趾尖,将无反射活动;
③同时用蘸有稀硫酸的纸片放到该脊蛙的背部,脊蛙出现掻扒反射。再过一段时间,搔扒反射消失。下列说法正确的是
A.①出现的正常反射为膝反射
B.搔扒反射的感受器是背部皮肤中的肌梭
C.从以上实验可以看出坐骨神经属于混合神经
D.掻扒反射消失的可能原因是传入神经纤维被麻醉
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