Question

【题目】生活饮用水的微生物安全性日常检测是非常重要的。请回答下列问题：

（1）将己知体积的饮用水用____________过滤后，将其放在含有____________培养基上培养，根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。

（2）为了探究温度对大肠杆菌种群数量的影响。将适量大肠杆菌菌液与适量的无菌葡萄糖溶液混合均匀，取等量取适量接种到若干培养瓶中，随机均分成几组，并编号，现在在显微镜下用血细胞计数板进行计数，并记录，再将各组分别置于不同温度的环境中培养两周，每天同一时间取样技计数，并记录。统计分析实验所得数据。

①请预期实验结果（设计一个坐标系，分别画出大肠杆菌在最适温度及高于、低于最适温度时的种群数量变化趋势曲线）

②在整个实验过程中，从静置培养瓶中取培养样液计数时应注意______________________。培养后期样液需用____________稀释后再计数。将样液稀释103倍，采用血细胞计数板计数 （计数室规格为2mm×2mm×0.1mm，共25个中格），所观察到的计数室中大肠杆菌分布如下图。若只以图中5个中格的统计为例，则培养液中大肠杆菌数为____________个/mL。

Answer 1

【答案】 滤膜 伊红美蓝 不同温度下大肠杆菌种群数量随时间变化的趋势图 摇匀培养液后再取样 无菌水 2.5×108

【解析】试题分析：酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况；利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定；探究酵母菌种群数量的变化实验中，实验流程为：①酵母菌培养（液体培养基，无菌条件），②振荡培养基（酵母菌均匀分布于培养基中），滴加培养液时，应先加盖玻片，再在盖玻片的边缘滴加培养液，③观察并计数→重复②、③步骤（每天计数酵母菌数量的时间要固定），④绘图分析。

（1）伊红-美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸，菌体带H+故菌落被染成深紫色（黑色），从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。因此将己知体积的饮用水用滤膜过滤后，将其放在含有伊红美蓝培养基上培养，进而鉴定和计算大肠杆菌的存在和数目。

（2）实验的自变量是时间和温度，因变量是大肠杆菌种群数量，因此横坐标是时间，纵坐标是种群数量，不同的温度用不同的曲线表示，温度高于或等于最适宜温度，种群数量增加都会变慢，如图：

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（3）静置培养瓶中大肠杆菌分布不均匀，因此从静置培养瓶中取培养样液计数时应注意摇匀培养液后再取样；培养后期大肠杆菌数量过高，不利于计数，因此应该用无菌水稀释后再计数；据图分析，5个中格中大肠杆菌的平均数为4个，则25个中格中的大肠杆菌共100个，因此培养液中大肠杆菌数=100÷（2×2×0.1×10-3）×103=2.5×108个/mL。