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    下图a示基因工程中经常选用的载体－pBR322质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了检查载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌，将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上，得到如图b的结果（黑点表示菌落）。再将灭菌绒布按到图b的培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养，得到如图c的结果（空圈表示与b对照无菌落的位置）。据此分析并回答：

    （1）pBR322质粒的基本组成单位是________。在基因工程中，质粒上的Amrr、Tetr称为________基因。

    （2）与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是________，由此说明________。

    （3）将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作中的________步骤，该基因工程中的受体细胞是________。

    答案：
    解析：

    　　（1）脱氧核苷酸；标记

    　　（2）能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素；目的基因插入了Tetr中

    　　（3）筛选含目的基因的受体细胞；大肠杆菌


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    科目：高中生物 来源：2010-2011学年吉林省实验中学高二上学期期末质量检测生物试卷 题型：综合题

    下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的     酶；二是将目的基因与运载体拼接的      酶；三是作为运载体的质粒。
    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“         ”、“        ”、“        ”三种，其中有效的（所需要的）基因表达载体是        ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（基因表达载体）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（基因表达载体）是         。
    （4）有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的      。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是             。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是             。是因为这种微生物很容易侵染到                
    中，从而把它的Ti质粒上的             转移到受体细胞染色体的DNA上。
    （5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是       ；作用于b位置的酶是
                    。

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    科目：高中生物 来源：2010年上海市虹口区高三第二次模拟考试生物试题 题型：综合题

    （8分）下图（一）为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的             酶；二是将目的基因与运载体拼接的              酶；三是作为运载体的质粒。
    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有：目的基因－目的基因、目的基因－运载体和运载体－运载体三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是                 ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。
    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）导入无任何抗药性的原核宿主细胞，并接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是               。含有效的重组基因（目的基因-运载体）的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________（能/不能）生长。
    （4）在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是         。
    （5）图（二）中，作用于a 位置的酶是              ；作用于b 位置的酶是                 。

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年重庆南开中学高三12月月考生物卷（解析版） 题型：综合题

    (26分)Ⅰ．科学家从某抗旱植物中得到抗旱基因(R)，培育出抗旱转基因农作物。回答下列问题：

    (1)在基因工程中，抗旱基因(R)被称为______。“分子缝合针”DNA连接酶按来源不同可分为____________和____________两类。

    (2)如果用农杆菌转化法将R基因导入农作物细胞的染色体DNA上，应先将R基因插入农杆菌Ti质粒的______上，然后再让该农杆菌去感染农作物细胞。

    (3)转基因农作物细胞经植物组织培养可得到转基因农作物植株，该过程的技术关键是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞先后进行____________。

    (4)若得到的抗旱转基因农作物植株的基因类型有甲或乙两种(R基因的整合位点如下图，只考虑其中的两对染色体，且R基因都能正常表达)，让该植株自花传粉，若子代抗旱植株所占比例为100％，则R基因的整合位点属于图______类型。

    Ⅱ．图l是高等动物细胞亚显微结构模式图，图2是某雄性生物的细胞分裂示意图，图3表示图2生物细胞分裂过程中不同时期细胞内染色体、染色单体和DNA含量的关系。请据图回答问题：([   ]中填序号或字母，______填文字)

    (1)若图1表示人体骨髓干细胞，则该细胞可能会发生图2中[____]细胞所示的分裂现象，星射线的形成与图1中[   ]__________有关。

    (2)若图1表示浆细胞，则与抗体形成和分泌有关的单层膜细胞器是_______(填字母)。含18O的氨基酸在浆细胞内的代谢过程中产生了H218O，那么水中的18O最可能来自于氨基酸的______ (填基团)。

    (3)若该个体有两对等位基因(YyRr)，分别位于两对同源染色体上，则图2中A细胞相对应的基因组成可能为____________

    (4)基因的自由组合发生于图3中的______时期(填罗马数字)，图3由III变化为IV应于图2中的细胞变化是______。

     

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年北京市高三第一学期期中测试生物卷（解析版） 题型：综合题

    14分）、某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

    (1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于______                          。

    (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制，也不能______                    。

    (3)在构建重组质粒时,应选用______       和_____        _两种酶对______           和_____               _进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

    (4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

    培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______       、_____             _。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______       菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______           作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从        水平鉴定烟草植株的耐盐性。

    (5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______          技术，愈伤组织经______               进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                      。

     

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    科目：高中生物 来源：2012届吉林省高二上学期期末质量检测生物试卷 题型：综合题

    下图（一）为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的      酶；二是将目的基因与运载体拼接的       酶；三是作为运载体的质粒。

    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的动载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有“          ”、“         ”、“         ”三种，其中有效的（所需要的）基因表达载体是         ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（基因表达载体）与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（基因表达载体）是          。

    （4）有效的基因表达载体成功导入受体细胞进行表达时，首先需要进行转录，RNA聚合酶识别和结合的位点是图（一）中的       。在动物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。在植物基因工程中，将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是              。是因为这种微生物很容易侵染到                

    中，从而把它的Ti质粒上的              转移到受体细胞染色体的DNA上。

    （5）在基因工程中，作用于图（二）所示a位置的酶是        ；作用于b位置的酶是

                      。

     

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