Question

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正确的是（　　）

• A、若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏2个磷酸二酯键
• B、若图1虚线方框内的碱基对被T-A替换，那么基因D就突变为基因d，用限制酶SmaⅠ完全切割杂合子个体中图1的DNA片段，会产生3种不同的DNA片段
• C、若需切割图2中的质粒以便于拼接目的基因D，应选择限制酶BamHⅠ和MboⅠ
• D、若用上述条件构建含有目的基因D的重组质粒并成功导入细菌体内，则此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图1：图中DNA片段含有2个限制酶SmaⅠ切割位点，可被限制酶SmaⅠ切割产生长度为534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三种DNA片段．基因D两侧序列为GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割；分析图2：用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因．GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割，用限制酶MboⅠ切割质粒后，破环抗生素A、B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌不能抗生素B，也不能抗抗生素A．

解答： 解：A、若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏4个磷酸二酯键，A错误；
B、从杂合子（Dd）分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有4种不同DNA片段，B错误；
C、目的基因两侧是GGATCC序列，该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒，所以应选用限制酶BamHⅠ切割，C错误；
D、用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，用限制酶MboⅠ切割质粒后，破环抗生素A、B抗性基因，此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活，D正确．
故选：D．

点评：本题考查基因工程操作的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力．