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回答下列关于基因工程的问题下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线,表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

(1)若对图2中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性如何变化,为什么?_____________。
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒,可以只用EcoRⅠ同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,后一个方法的优点在于可以防止__________。
(3)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入__________酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________。
(4)图1过程①可采用的操作方法是____________,过程②可采用的生物技术是_____________。过程③可采用的生物技术是________________。
(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是___________________。
(1)SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C,而G和C之间可以形成三个氢键,A和T之间可以形成二个氢键,所以SmaⅠ酶切位点越多,热稳定性就越高
(2)只使用EcoRⅠ,则质粒和目的基因两端的粘性末端相同,用连接酶连接时,会产生质粒和目的基因自身连接物,而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切时,质粒和目的基因两端的粘性末端不同,用DNA连接酶连接时,不会产生自身连接产物。
(3)DNA连接酶        筛选
(4)显微注射       细胞培养        胚胎移植技术
(5)DNA转录成mRNA,mRNA翻译成蛋白质
练习册系列答案
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科目:高中生物 来源: 题型:

回答下列关于基因工程的问题

下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线,表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

(1)若对图2中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性如何变化,为什么?                                                                     

(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒,可以只用EcoR I同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因,后一个方法的优点在于可以防止                                       

(3)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入        酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了          

(4)图1过程①可采用的操作方法是             ,过程②可采用的生物技术是      。过程③可采用的生物技术是                

(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是_______________。

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科目:高中生物 来源: 题型:阅读理解

回答下列关于基因工程的问题:

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,根据图示所给信息回答下列问题:

(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时,用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒,露出相同的黏性末端,将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的             ,使质粒与目的基因结合成重组质粒。

(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒;有的导入的是普通质粒A;只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:

将得到的细菌涂抹在一个含有                的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                                                                  

(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒,将得到的细菌涂抹在一个含有

                的培养基上培养,若细菌                ,则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程,应该用                                    作为探针。

(4)使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴                        的途径。

(5) 目的基因表达成功后,“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看,此变异属于         

       。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                    。

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科目:高中生物 来源:河北省衡水中学2009—2010学年度第二学期期中考试高二生物试卷 题型:综合题

回答下列关于基因工程的问题:
如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,根据图示所给信息回答下列问题:

(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时,用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒,露出相同的黏性末端,将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的            ,使质粒与目的基因结合成重组质粒。
(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒;有的导入的是普通质粒A;只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:
将得到的细菌涂抹在一个含有               的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                                                                
(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒,将得到的细菌涂抹在一个含有
               的培养基上培养,若细菌               ,则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程,应该用                                   作为探针。
(4)使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴                       的途径。
(5)目的基因表达成功后,“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看,此变异属于         
      。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                   。

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科目:高中生物 来源:2012-2013学年江苏省高三最后一次模拟考试生物试卷 题型:综合题

回答下列关于基因工程的问题。

草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡。但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内, 从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。

下图A-F表示6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题:

(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是_________。

(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。

(3)假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图1所示,则应选择表中酶__________进行酶切;若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图1和2所示,则应选择表中酶__________ 进行酶切。

(4)假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2所示,请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。(2分)

(5)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因_____________。

下图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)

(6)图乙的培养基中含有氨苄青霉素,请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中,何种会含有重组质粒。___________。

(7)现用EcoRI酶切质粒,酶切后进行电泳观察,若出现长度为_________kb和       kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计)

 

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科目:高中生物 来源:河北省2009—2010学年度第二学期期中考试高二生物试卷 题型:综合题

回答下列关于基因工程的问题:

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导入细菌B后,其上的基因能得到表达,根据图示所给信息回答下列问题:

(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时,用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒,露出相同的黏性末端,将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的             ,使质粒与目的基因结合成重组质粒。

(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高;导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒;有的导入的是普通质粒A;只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒:

将得到的细菌涂抹在一个含有                的培养基上,能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的,反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                                                                 

(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒,将得到的细菌涂抹在一个含有

                的培养基上培养,若细菌                ,则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程,应该用                                    作为探针。

(4)使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,主要是借鉴                        的途径。

(5) 目的基因表达成功后,“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看,此变异属于         

       。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                    。

 

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