Question

【题目】右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

（1）植物细胞工程常用的技术手段有__________。动物细胞工程的各技术手段中的基础是____________。

（2）若图中A、B是植物细胞，在细胞融合之前应用____________处理，除去________________；A、B到细胞C的过程中，常用的化学方法是利用____________诱导；融合完成的标志是____________。

（3）与植物细胞相比，动物细胞融合特有的诱导融合的方法是_____________。

（4）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应采用___________和____________两种细胞进行融合，融合后需经多次筛选，以得到能产特异抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选一般利用___________进行，第二次筛选需对细胞进行反复的________________，以筛选出能产特定抗体的杂交瘤细胞。

（5）少量生产单克隆抗体时，可将筛选得到的杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内繁殖，该方法的优点是_______。

Answer 1

【答案】（1）植物组织培养、植物体细胞杂交 动物细胞培养

（2）纤维素酶、果胶酶 细胞壁 PEG 再生出细胞壁

（3）灭活的病毒

（4）经免疫的B细胞 骨髓瘤细胞 选择培养基 克隆化培养和抗体（阳性）检验

（5）节约培养基（成本），易于控制培养条件等（经济，方便等，合理就给分）

【解析】（1）植物细胞工程常用的技术手段有植物组织培养、植物体细胞杂交。动物细胞工程的各技术手段中的基础是动物细胞培养。

（2）植物体细胞杂交前，先采用酶解法去除细胞壁，即采用纤维素酶、果胶酶处理除去细胞壁；诱导细胞融合常用的化学方法是PEG诱导；原生质体融合完成的标志是再生出细胞壁。

（3）诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇），诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）。因此，与植物细胞相比，动物细胞融合特有的诱导融合的方法是灭活的病毒。

（4）若利用动物细胞融合技术来生产单克隆抗体，应将经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，融合后需经多次筛选，以得到能产特异抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选一般利用选择培养基进行，第二次筛选需对细胞进行反复的克隆化培养和抗体阳性检验，以筛选出能产特定抗休的杂交瘤细胞。

（5）少量生产单克隆抗体时，可将筛选得到的杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔内繁殖，该方法的优点是节约培养基（成本），易于控制培养条件等。

项目	细胞融合原理	细胞融合方法	诱导手段	用途
植物体细胞杂交	细胞膜的流动性，（细胞的全能性）	去除细胞壁后诱导原生质体融合	离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导	克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合	细胞膜的流动性	使细胞分散后，诱导细胞融合	离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导	制备单克隆抗体的技术之一