Question

【题目】普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图所示）

（1）图1中,为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。②、③过程需重复几次,目的是 。

（2）某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如下图所示。该同学的接种方法是 ；根据平板菌落分布情况，请分析该同学存在的操作失误 。通过统计平板上的菌落数，能推测出样品中大约含有多少活菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。用此接种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ，原因是 。

（3）以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,工程酵母菌发酵罐需要先排气,其原因是 。

（4）上述工程酵母菌培养过程中，有关操作正确的是 。

A．玻璃刮刀用火焰灼烧进行灭菌

B．培养基分装到培养皿后进行灭菌

C．倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行

D．获得的菌种如果需要保存，可置于37℃恒温保存

Answer 1

【答案】（1）淀粉 筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（2 分）

（2）稀释涂布平板法 涂布不均匀 30-300 低

当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落 （2 分）

（3）工程酵母菌利用淀粉的速度很快，发酵产生CO2的速度也很快（其他合理答案也给分）（2 分）

（4）C

【解析】（1）该实验的目的是获得利用淀粉的工程酵母菌菌种，所以培养基应该以淀粉为唯一碳源。②、③过程需重复几次的目的是筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。

（2）图中平板培养后的结果，形成了多个菌落，因此为稀释涂布平板法，但是菌落分布不均匀，集中分布在一定区域，说明涂布不均匀。用稀释涂布平板法进行微生物计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。用此接种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落。

（3）工程酵母菌利用淀粉的速度很快，发酵产生CO2的速度也很快，所以用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,工程酵母菌发酵罐需要先排气。

（4）玻璃刮刀用酒精消毒，A错误；培养基分装到培养皿前进行灭菌，B错误；倒平板和取菌液都必须在酒精灯火焰旁进行，以防止杂菌污染，C正确；菌种的保存一般发生在低温的环境中，D错误。