Question

13．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，正确的是（　　）

• A． 操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板
• B． 将称好的牛肉膏用玻璃棒从称量纸上挑取放入烧杯
• C． 待培养基冷却至40℃左右时进行倒平板
• D． 培养基倒入培养皿后，立即将平板倒过来放置

Answer 1

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：
（1）计算：依据是培养基配方的比例．
（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖．
（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL．
（4）调pH；
（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌．
（6）倒平板．
2、培养基配制时的注意事项：
①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板．可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板．操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基．
③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染．
④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生．

解答 解：A、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A正确；
B、将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，并加热，B错误；
C、待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C错误；
D、培养基倒入培养皿后，待平板冷却凝固约5～10min后，再将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，D错误．
故选：A．

点评 本题考查微生物的培养和分离，重点考查培养基的制备过程，要求考生识记培养基制备的具体步骤，掌握各步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．