Question

【题目】北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，请回答：

（1）利用过程①的方法构建的基因文库是____________（填“基因组文库”或“部分基因文库”）。

（2）过程②中常需要使用限制酶和DNA连接酶，既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是_________________________。

（3）为使过程①获取的目的基因在番茄细胞中能够表达，在构建表达载体时，需在目的基因的两端加入________________________。

（4）将重组质粒导入农杆菌，并通过农杆菌的转化作用，可以将目的基因导入番茄体细胞中染色体的DNA上，其原理是__________________________________________。

（5）要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达，应检测转基因番茄植株中该基因的_______________是否呈阳性。

Answer 1

【答案】 部分基因文库 T4DNA连接酶 启动子、终止子 目的基因随农杆菌中Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上 表达产物

【解析】本题考查基因工程,解题要点是识记基因工程的操作工具及基本操作程序

(1)用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，是部分基因文库

(2) 既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是T4DNA连接酶

(3)一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子和终止子.

(4)因为农杆菌Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,如果将目的基因插入到Ti质粒上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其整合到受体细胞染色体的DNA上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.

(5)检测目的基因是否表达,可从转基因生物中提取基因的表达产物即蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交,若呈阳性,表明目的基因已成功表达.

[点睛]:本题易混点:1.关于基因文库:包含某生物所有基因的叫该生物的基因组文库,用mRNA反转录产生的DNA片段是部分基因文库;2.关于基因表达载体:一个基因表达载体应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因;3.目的基因的检测与鉴定中,可以利用DNA分子杂交技术，检测转基因生物染色体上的DNA是否插入了目的基因,以及目的基因是否转录出mRNA,而检测目的基因是否翻译出蛋白质,可用抗原-抗体杂交,若有杂交带,表明目的基因已成功表达出蛋白质.