Question

现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。
【实验原理】有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。
【实验材料】活的小白鼠胚胎。
【药品用具】胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。
【实验步骤】

（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入____处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。

（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，____，加入等量的细胞悬浮液。
②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入____，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀。
③在实验中，C培养瓶起什么作用？____。

（3）制作临时装片
①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞____，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用____染色，3～5min后，盖上盖玻片。

（4）镜检和统计
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于____期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计____。
【结果与结论】
经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：Q_A=1.3%、Q_B=12.5%、Q_C=0.1%，由此可知该实验的结论是____。

Answer 1

（1）胰蛋白酶液；

（2）消毒灭菌；等量的化学物质乙；对照；

（3）从瓶壁上脱落；适宜浓度的龙胆紫溶液；

（4）细胞有丝分裂中期；该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）；
实验的结论是：甲乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲

（1）胰蛋白酶能够使动物组织分散成单个细胞。
（2）培养瓶在加入培养液前需消毒灭菌，该实验的自变量是有毒物质的有无以及浓度，因变量是染色体的变异情况，所以需向三个培养瓶中加入等量的细胞悬浮液，并放在相同适宜温度的培养箱中培养。检测染色体的方法是龙胆紫染液。
（4）QA>QC、QB>QC，说明甲、乙两种化学物质均有毒性，QB>QA，说明乙的毒性大于甲。C瓶起对照作用，C瓶中Q值>0，说明动物细胞在正常培养状态下变异频率很低。