Question

19．促红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病．由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人促红细胞生成素（rhEPO），生产流程如图，请回答下列问题：
（1）图中①所指的技术中，需要在进行过程中补充的物质是原料和引物．图中②所指的物质是mRNA，检测细胞能否表达出③的方法是抗原--抗体杂交技术．
（2）受体细胞选择仓鼠卵巢细胞系，主要是基于这种细胞的可无限增殖特性．培养重组CHO 细胞时，除适宜的温度及无菌条件外，还需要保证的环境因素是气体条件（5%CO₂浓度），为防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，应定时更换培养液（定期换瓶）．
（3）科学家经过努力现已研制出了可以口服的EPO，为培育出乳汁中含有此类EPO的转基因牛，需选择受精卵作为受体细胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技术主要有体外受精、体外胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割（要求填两项）．

Answer 1

分析 据图分析可知：①和②过程都是获取目的基因的途径，①是利用PCR技术短时间内扩增目的基因，②是通过反转录法获取目的基因．获得此图是利用基因工程技术生产的重组人工红细胞生成素（rhEPO）期间要生产流程，最终产物是红细胞生成素（rhEPO），由此可推测出图中高效表达出③的重组CHO细胞是高效表达出红细胞生成素（rhEPO）的重组细胞．但是在细胞培养过程中，细胞代谢产物增多、PH下降、营养物质逐渐减少等等因素，为了防止细胞受到伤害，应该定期更换培养液．

解答 解：（1）图中①表示利用PCR技术扩增目的基因，PCR技术过程中需要补充原料和引物．反转录法获取目的基因时首先需要利用mRNA作为模板，通过逆转录过程合成cDNA，检测细胞能否表达出EPO的方法是抗原--抗体杂交技术．
（2）受体细胞选择仓鼠卵巢细胞系，主要是基于这种细胞的可无限增殖特性．培养重组CHO 细胞时，除适宜的温度及无菌条件外，还需要保证一定的气体条件（5%CO₂浓度），为防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，应定时更换培养液（定期换瓶）．
（3）科学家经过努力现已研制出了可以口服的EPO，为培育出乳汁中含有此类EPO的转基因牛，需选择受精卵作为受体细胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技术主要有体外受精、体外胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割等．
故答案为：
（1）原料和引物    mRNA     抗原--抗体杂交
（2）可无限增殖    气体条件（5%CO₂浓度）   定时更换培养液（定期换瓶）
（3）受精卵    体外受精、体外胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割

点评 本题以“促红细胞生成素”的合成为题材，考查基因工程、细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，识记动物细胞培养的原理及培养条件，能结合题中信息准确答题．