Question

8．叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改良植物的品质．请回答：
（1）转基因技术的核心步骤是构建基因表达载体，完成该步骤所需要的酶有限制酶和DNA连接酶．
（2）将植物体细胞用纤维素酶或果胶酶处理得到原生质体，再通过农杆菌转化法或基因枪法法，将目的基因导入原生质体，使原生质体再生出细胞壁之后，通过植物组织培养技术培养可得到相应的转基因幼苗．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建（核心步骤）；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．
2、植物体细胞杂交的过程：

解答 解：（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；构建基因表达载体时首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（2）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，将植物体细胞用纤维素酶或果胶酶处理得到原生质体，再通过农杆菌转化法或基因枪法，将目的基因导入原生质体，使原生质体再生出细胞壁之后，通过植物组织培养技术培养可得到相应的转基因幼苗．
故答案为：
（1）构建基因表达载体  限制酶和DNA连接酶　　
（2）纤维素酶或果胶酶　　农杆菌转化法或基因枪法　　植物组织培养

点评 本题考查基因工程和植物细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记植物体细胞杂交的过程及植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确答题．