Question

不属于目的基因与运载体结合过程的是（　　）

• A、用一定的限制性内切酶切割质粒露出黏性末端
• B、用同种限制性内切酶切断目的基因露出黏性末端
• C、将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处
• D、将重组DNA引入受体细胞中进行扩增

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答： 解：AB、构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，以产生相同的黏性末端，A正确，B正确；
C、构建基因表达载体时，还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体结合形成重组DNA分子，C正确；
D、将重组DNA引入受体细胞中进行扩增不属于基因表达载体的构建过程，属于将目的基因导入受体细胞的过程，D错误．
故选：D．

点评：本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．