分析 1.基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶,一种限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成粘性末端或平末端;
2.DNA连接酶只能连接相同的粘性末端,若用同种限制酶切割,则容易形成质粒或目的基因自身环化的结构;
3.构建基因表达载体时,必须包含目的基因、标记基因、启动子、终止子及复制原点等结构.
解答 解:(1)根据题意:在pBV220载体(图A)多克隆位点的EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点之间插入目的基因IL1-His,构建表达载体pBV-IL1-His(图B),故为了防止目的基因和pBV220载体在酶切后的末端发生任意连接,导致自身环化,酶切时应选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ;根据图示,为插入前的载体为3666bp,但插入目的基因之后的长度为4153bp,故目的基因的长度为4153-3666=487bp;构建基因表达载体时,必须包含目的基因、标记基因(氨苄青霉素抗性基因)、启动子、终止子等结构.
(2)将目的基因导入细菌等微生物的方法是感受态细胞法,转化感受态大肠杆菌时需要用Ca2+处理细胞;利用PCR技术体外扩增DNA时,不需要加入解旋酶,原理是DNA的热变性,将双链DNA加热到90℃以上,目的是使双链DNA变性,解聚为单链.
(3)基因工程的最后一步是目的基因的检测与鉴定,检测目的基因是否表达成相应的蛋白质,方法是抗原-抗体杂交技术;假设未检测出目的蛋白则目的基因表达不成功,原因可能是目的基因在受体细胞中没有表达.
故答案为:
(1)EcoRⅠ和BamHⅠ487 启动子、终止子
(2)Ca2+使双链DNA变性,解聚为单链
(3)抗原-抗体杂交 目的基因在受体细胞中没有表达
点评 本题重点考查基因工程的有关知识,要求掌握基因工程的操作步骤及在生产实践中的运用;能够对基因工程中DNA片段的长短进行简单的计算,难度适中.
科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源:2015-2016学年北京市高二上学期期末生物试卷 (解析版) 题型:选择题
人体内环境稳态是机体进行正常生命活动的必要条件。神经﹣体液﹣免疫调节网络是机体维持稳态的主要调节机制。下列相关的叙述中,正确的是( )
①血浆、组织液和淋巴共同构成了机体内细胞生活的直接环境
②神经调节的基本活动方式是反射,完成反射的结构基础是神经元,兴奋从一个神经元的轴突传至另一神经元的树突或胞体
③激素是通过体液的传输,作用于靶细胞或靶器官的信息分子
④血糖的平衡调节是通过激素调节完成的
A.①②④ B.②④ C.①② D.①③
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 杀虫剂与靶位点结合形成抗药靶位点 | |
B. | 杀虫剂的使用是基因pen发生突变的根本原因 | |
C. | 昆虫发生抗药性进化的实质是种群基因频率的改变 | |
D. | 野生型昆虫和pen基因突变型昆虫之间存在生殖隔离 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | Yyrr | B. | yyRr | C. | YyRr | D. | yyrr |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 该病毒仅含有核糖体这一种细胞器 | |
B. | 该病毒核酸的复制需要宿主细胞的呼吸作用提供能量 | |
C. | 该病毒的遗传物质可直接整合到宿主细胞的染色体中 | |
D. | 该病毒感染人体后,其遗传信息的传递与乙肝病毒相同 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 1个 | B. | 2个 | C. | 3个 | D. | 4个 |
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