Question

【题目】人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示（注：基因B为高血压相关基因）。

（1）进行①过程之前，需对人工采集的精子进行 处理。完成②过程常采用的方法是 ，④过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。

（2）从人体细胞中获取基因B时用到的工具酶是 ，在构建的基因表达载体中，高血压相关基因的首端必须有 ，它是RNA聚合酶的识别和结合部位。

（3）图示中甲为 （时期）的去核卵母细胞，⑤过程操作技术叫做 。

（4）要在分子水平上检测成功导入的B基因在大鼠中是否成功表达，可采用 方法，如果高血压相关基因已在大鼠体内成功表达，可用其建立高血压转基因动物模型。

Answer 1

【答案】（1）获能（2分）显微注射法 抗生素（2）限制性核酸内切酶（限制酶） 启动子（2分）

（3）减数第二次分裂中期（MII中期）（2分）核移植（2分） （4）抗原-抗体杂交

【解析】试题分析：(1)过程①表示体外受精的过程，在进行此过程之前，首先需要对精子进行获能处理。“获能”是精子与卵子结合前必需的准备过程，没有这个过程就不能完成受精。②过程表示的是将外源基因导入受体细胞，导入动物受精卵一般用显微注射的方法。动物细胞培养需要满足以下条件：无菌、无毒的环境，培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。（2）获取目的基因时可用到的工具酶是限制酶，基因表达载体的构建启动子是为了启动下游基因的“表达”，表达首先需要转录，因此RNA聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始，DNA聚合酶识别和结合的部位是DNA复制的起始。（3）卵细胞培养到减数第二次分裂中期时，才具有与精子受精的能力，⑤过程表示细胞核移植技术。（4）基因工程中，导入了目的基因，但不知道它是否成功表达，即是否合成相应蛋白质，所以用抗原与抗体杂交技术，验证这种蛋白质的存在，确定基因是否表达。