Question

【题目】紫杉醇是目前最好的抗肿瘤药物之一，但其药源植物红豆杉十分稀缺。大多数红豆杉细胞培养物的紫杉醇产量较低，研究人员通过构建紫杉醇合成关键酶(Bapt)基因的超表达载体来提高紫杉醇产量，其流程如下。

(1)过程①②使用的工具酶分别是_________和_________。

(2)p1303载体上有一种叫增强子的元件，结合题意推测增强子的作用是_________。除了与目的基因表达有关的功能元件之外，p1303载体上还应有_________标记基因和_________。

(3)能否通过Bapt基因探针来检测步骤⑤是否成功?为什么? _________。

(4)为检验最终的实验目的是否达到，还应检测_________。

Answer 1

【答案】逆转录酶 Taq酶 促进Bapt基因的表达 潮霉素 复制原点 不能，因为红豆杉细胞中本身存在Bapt基因，不管超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基困探针形成杂交分子 紫杉醇的产量

【解析】

据图①逆转录构建红豆杉的cDNA文库；②PCR技术扩增Bzpt基因；③表达载体的构建④将表达载体导入受体细胞；⑤用含有表达载体的农杆菌感染受体红豆杉细胞。

（1）①为逆转录过程，需要逆转录酶的催化；②为PCR扩增过程，该过程需要使用Taq酶。

（2）根据题干信息“研究人员通过构建紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的超表达载体来提高紫杉醇产量”可知，p1303载体上增强子的作用是促进Bapt基因的表达。基因表达载体的组成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因、复制原点等，由图可知，标记基因是潮霉素抗性基因，因此除了与目的基因表达有关的功能元件（启动子和终止子）之外，p1303载体上还应有标记基因（潮霉素抗性基因）和复制原点。

（3）因为红豆杉细胞中本身存在Bapt基因，不管超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基因探针形成杂交分子，因此不能通过Bapt基因探针来检测步骤⑤是否成功。

（4）根据题干信息“研究人员通过构建紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的超表达载体来提高紫杉醇产量”可知，为检验最终的实验目的是否达到，还应检测紫杉醇的产量。