Question

13．实验人员从环境中分离获得白腐菌，以白腐菌的菌丝或孢子制得固定化白腐菌凝胶颗粒，各取25个两种凝胶颗粒分别处理50mL染料废水，实验结果如图1．进一步研究不同数量的凝胶颗粒处理50mL染料废水结果如图2．据图分析回答：

（1）从野外采集白腐菌前，先向待采集土壤喷洒适量的染料废水的目的是使分解染料的白腐菌富集．某同学在进行白腐菌分离纯化实验时，划线某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成第一条划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却（或划线未从第一区域末端开始）．将收集到的菌丝或者孢子加入到适量的海藻酸钠溶液中混匀，抽取5mL混合液，滴加到CaCl₂溶液中，该过程中CaCl₂溶液的作用是与海藻酸钠反应形成凝胶球（凝固剂）．
（2）现要处理100L皮革生产过程中产生的染料废水．从实验结果分析，应选用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝胶颗粒，添加60000个凝胶颗粒后，保持10天以上，以达到最好的净化效果．
（3）与向染料废水中直接接种白腐菌相比，在工业生产中使用固定化白腐菌凝胶颗粒的优点主要是可以反复利用．

Answer 1

分析 1、制备培养基时倒平板中的主要操作；平板划线时，每次划线前都要进行灼烧，最后一次划线结束也要进行灼烧．
2、根据图1和图2显示可以发现：应选用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝胶颗粒脱色率较高．由图1可知：净化时间需要保持10天以上，净化效果较好．根据图2显示：固定化白腐菌孢子的凝胶颗粒处理50mL染料废水时，固定化白腐菌孢子的凝胶颗粒达到30个时，已达到饱和．

解答 解：（1）从野外采集白腐菌前，先向待采集土壤喷洒适量的染料废水的目的是使分解染料的白腐菌富集．纯化菌株时，通常使用接种环进行划线．划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却、划线未从第一区域末端开始．CaCl₂溶液的作用是与海藻酸钠反应形成凝胶球（凝固剂）．
（2）根据图1和图2显示可以发现：应选用固定化白腐菌孢子（或孢子）凝胶颗粒脱色率较高，故选之．由图1可知：净化时间需要保持10天以上．根据图2显示：固定化白腐菌孢子的凝胶颗粒处理50mL染料废水时，固定化白腐菌孢子的凝胶颗粒达到30个时，已达到饱和．故处理100L废水，需要添加$\frac{100×1000×30}{50}=60000$个凝胶颗粒．
（3）使用固定化白腐菌凝胶颗粒的优点主要是可以反复利用．
故答案为：
（1）使分解染料的白腐菌富集　接种环灼烧后未冷却（或划线未从第一区域末端开始，答到任意1点即给分）　与海藻酸钠反应形成凝胶球（凝固剂）
（2）固定化白腐菌孢子（或孢子）　60000　10
（3）可以反复利用

点评 本题考查固定化酶的相关内容，要求考生掌握平板划线法接种时需要注意的细节问题，能结合图中信息准确答题