Question

科研人员将绿色荧光蛋白（GTP）基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究，请回答：
（1）上述过程中的GTP基因称为

 

，该基因可由mRNA

 

形成．
（2）已知GTP基因的DNA两端分别有EcoR I、Sma I切割位点，切割下来的GTP基因含有

 

 末端和

 

末端．
（3）质粒用EcoR I、Sma I切割之后，需用

 

将GTP基因与其连接形成重组质粒．
（4）GTP基因重组质粒导入受精卵通常用

 

法，受精卵经过卵裂、桑椹胚、

 

、原肠胚等阶段发育为胚胎．紫外光下观察，可以看到转基因鱼发光部位存在差异，其原因是

 

．
（5）构建重组质粒时，可用GTP代替抗氨苄青霉素基因作为

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析：1、目的基因：主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子．获得目的基因的方法：①从基因文库中获取  ②利用PCR技术扩增  ③人工合成（化学合成）．
2、限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化出来的．其能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．结果是经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．
DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．在构建基因表达载体时，DNA连接酶将目的基因和质粒重组．
2、将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射技术．（最有效一种方法）．具体操作程序：目的基因表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的子宫或输卵管内发育→新性状动物．

解答： 解：（1）将绿色荧光蛋白（GTP）基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究，说明GTP基因是目的基因．获取目的基因的方法有很多，可以通过mNRA反转录法人工合成．
（2）据题可知EcoRI、SmaI上限制性酶，它们分别可将目的基因切割，并产生黏性末端和平口末端．
（3）在构建基因表达载体时，需要DNA连接酶将目的基因和质粒中被限制酶切割的末端连接．
（4）受体细胞是动物细胞时，可用显微注射法将基因表达载体转化入受体细胞中．早期胚胎发育经过卵裂期、桑葚胚期、囊胚期、原肠胚期．紫外光下观察，可以看到转基因鱼可以发光，说明了目的基因在受体中已经能表达出相应的蛋白质了，但是发光部位存在差异，说明了目的基因的表达具有选择性．
故答案为：
（1）目的基因    反转录 
（2）黏性   平
（3）DNA连接酶
（4）显微注射   囊胚   基因选择性表达
（5）标记基因

点评：本题考查了基因工程的相关内容，意在考查能理解所学知识的要点，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论．