Question

将PVY病毒外壳蛋白基因（PVY-CP）导人马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯．图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP可以从质粒A中获取；质粒B是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：

BamH I	HindⅢ	BglII	Sma I
G↓GATCC CCTAG↑G	A↓ACCTT TTCGA↑A	A↓GATCT TCTAG↑A	CCC↓GGG GGG↑CCC

请结合图象，运用所学知识回答问题：
（1）含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为

 

．
（2）关于步骤②中Klenow酶的猜测，合理的是

 

．
A．催化合成的片段起引物作用       B．可以将DNA片段的粘性末端变成平末端
C．能催化DNA链的合成             D．与DNA连接酶的功能相同
（3）步骤④中应该使用的限制酶是

 

．
（4）利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导人

 

中，进而转化马铃薯，然后通过

 

技术获得抗PVY病毒马铃薯苗，最后进行相关的鉴定．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,植物培养的条件及过程

专题：

分析：分析题图：图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，步骤①～③是从质粒A中获取目的基因（PVY-CP）的过程；质粒B是选用的运载体；④过程需要用限制酶处理质粒B；⑤表示基因表达载体的构建过程，该过程需要DNA连接酶．

解答： 解：（1）将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各受体菌分别含有这种生物的不同的基因，这个受体菌群称为基因文库．
（2）由图可知，步骤②中用Klenow酶处理后，黏性末端变成平末端，说明Klenow酶能催化DNA链的合成，从而将DNA片段的粘性末端变成平末端．故选：BC．
（3）经过步骤③后，目的基因（PVY-CP）的一侧是BamH I切割形成的黏性末端．目的基因（PVY-CP）的另一侧是平末端，表中只有SmaⅠ切割后形成的是平末端．综上可知，步骤④中应该使用的限制酶是BamH I、SmaⅠ．
（4）利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导人农杆菌中，再用农杆菌感染马铃薯，进而转化马铃薯；将马铃薯细胞培养成马铃薯植株还需要采用植物组织培养技术．
故答案为：
（1）基因文库（或部分基因文库）
（2）BC
（3）BamH I、SmaⅠ
（4）农杆菌植物组织培养

点评：本题结合图表，考查基因工程、植物组织培养，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能分析流程图，从中获取有效信息准确判断第（2）题；能分析表格，明确BglⅡ和BamHI切割后形成的黏性末端相同；识记植物组织培养技术的过程及应用．