Question

14．回答下列有关遗传信息传递和表达的问题．
（1）如图1所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），那么所形成的重组质粒pZHZ2A．
A．既能被E也能被F切开        B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开     D．能被F但不能被E切开
（2）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点0.5kb．若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表（图2）所列酶切结果判断目的基因的大小为1.2kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图3中．

（3）若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒pZHZ2导入至山羊的受精卵细胞中．
（4）下列四幅图中（如图4）能正确反映目的基因转录产物内部结构的是B．
TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子．

Answer 1

分析 根据题中信息，限制酶具有专一性，只能识别特定的DNA序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键形成DNA片段，获取目的基因和质粒时切割位点是E和F，重组质粒上含有限制酶E和F的切割位点，所以既能被E也能被F切开．原来质粒长度为3.7kb，切去EF之间的片段（0.2kb）还剩3.5kb，插入目的基因（1.2kb）后构成重组质粒，则重组质粒长度为1.2+3.5=4.7kb．

解答 解：（1）用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故A正确．
（2）根据题中信息，原来质粒长度为3.7kb，切去EF（0.2kb）之后还有3.5kb，插入目的基因后形成重组质粒，重组质粒的长度为1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，进而可推导出目的基因长度为4.7-3.5=1.2kb．重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.8kb，单独用限制酶G切割后产生1.6kb和3.1kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的G酶切位点外，还有一个G酶切位点；H的酶切位点距F0.5kb，用H单独酶切后产生1.2kb和3.5kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的H酶切位点外，还有一个H酶切位点；根据题中信息提示“将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中”，可确定在EF之间分别含有一个G和H的酶切位点，进而可断定G的识别位点，在距E点右侧0.8kb处，H的识别位点在距F左侧0.7kb处．目的基因内部的限制酶G和H切割位点的位置为：

（3）将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵作为受体细胞，当受精卵发育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表达产物．
（4）在目的基因的起始端有启动子，末端有终止子，因此转录形成的mRNA初始位置为TSS（转录起始位点），在末端位置有TTS（转录终止位点）；同时mRNA将作为蛋白质合成的直接模板，因此其中含有起始密码子和终止密码子控制翻译过程的进行，两个密码子分别位于TSS内侧和TTS内侧．
故答案为：
（1）A
（2）1.2    

（3）受精卵
（4）B

点评 本题综合考查基因工程的相关内容，涉及到基因工程常用工具酶的切割位点的确定、根据限制酶切割结果推断目的基因的长度、基因工程中常用的受体细胞、密码子反密码子的推导等问题，综合性强，有一定难度．