Question

【题目】大量的科学研究已经证明，VP40蛋白基因的基因突变或者VP40蛋白的缺失会终止埃博拉病毒的侵染行为，因此制备针对VP40蛋白的抗体可能是战胜埃博拉病毒的新途径。请据图回答：

（1）过程①中选用两种限制酶切割，使目的基因的两端获得不同的黏性末端，这样处理的目的是_______。

（2）图中过程②需要用_________处理大肠杆菌。在基因表达载体中，VP40蛋白基因的首端必须含有______，其作用是能够被__________识别和结合，从而保证③顺利完成。

（3）为检测VP40基因是否成功表达，可以采用________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是____________________。

Answer 1

【答案】 防止目的基因环化（防止目的基因与质粒错误连接） Ca2+ （CaCl2） 启动子 RNA聚合酶 抗原-抗体杂交 VP40蛋白抗体与VP40蛋白结合，阻止了埃博拉病毒侵染细胞

【解析】试题分析：据图分析，①表示构建基因表达载体，②表示将重组质粒导入大肠杆菌，③表示大肠杆菌产生VP40蛋白（作为抗原）；④诱导细胞融合，产生杂交瘤细胞。

（1）过程①中选用两种限制酶切割目的基因和质粒，可以使得目的基因和质粒都露出两种不同的粘性末端，可以防止目的基因环化、目的基因与质粒错误连接等。

（2）②表示将重组质粒导入大肠杆菌，需要用钙离子处理大肠杆菌，使得大肠杆菌成为感受态细胞；基因表达载体中，目的基因的首端必须含有启动子，是RNA聚合酶的识别位点，启动转录过程。

（3）VP40基因成功表达的产物是VP40蛋白，可以用抗原-抗体杂交进行检测；VP40蛋白抗体与VP40蛋白结合，阻止了埃博拉病毒侵染细胞。