Question

科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白（且具有抗菌能力）．这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视．临床使用发现此蛋白质对肿瘤确有良好的疗效，可以通过基因工程技术导人大肠杆菌内进行大量生产，其过程大体如图甲；通过细胞工程还可以将抗肿瘤蛋白临床使用，如图乙是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有

 

（至少答两种）．
（2）图甲中，酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时，所用的限制酶可以不同，但是产生的粘性末端要满足

 

条件．
（3）将抗肿瘤基因导人大肠杆菌，并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白，由于大肠杆菌

 

，因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白．
（4）图乙中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是

 

细胞，要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过

 

次筛选．
（5）从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是

 

．
（6）图乙中，B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的

 

、聚乙二醇或电激等诱导．
（7）为检测图甲中的大肠杆菌细胞内是否成功表达了抗肿瘤蛋白，可以采用

 

法．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：目的基因导入植物细胞常用的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法；目的基因导入微生物需要用Ca²⁺处理，使其成为感受态细胞．
单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体，涉及动物细胞培养和动物细胞融合技术；杂交瘤细胞集合了两个细胞的遗传物质，但不一定全部表达；单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，具有准确、快速等优点．

解答： 解：（1）在基因工程中，获取目的基因的方法有从基因文库中获取目的基因、PCR扩增目的基因、人工合成目的基因．
（2）基因表达载体的构建过程，需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接起来，所以两者需要相同的黏性末端且能完全互补．
（3）选用大肠杆菌作为受体细胞，原因是：繁殖速度快，可以在短时间内获得要表达的蛋白质
（4）单克隆抗体的制备过程中，采用的是已免疫的小鼠B细胞，即经过注射特异性抗原，然后和骨髓瘤细胞的融合，而融合后会形成多种细胞，需要经过至少两次筛选，最终筛选出来的杂交瘤细胞，既能在体外条件下大量增殖，又能产生特异性抗体．
（5）给小鼠注射抗原可促进小鼠体 产生相应的浆细胞．
（6）动物细胞融合过程需要用灭活的病毒来诱导．
（7）检测蛋白质分子的方法是抗原-抗体杂交．
故答案为：
（1）从基因文库中获取目的基因、PCR扩增目的基因、人工合成目的基因  
（2）黏性末端能完全互补
（3）繁殖快、产量较高    
（4）B淋巴（浆）   2 
（5）（特异性）抗原  
（6）病毒（或仙台病毒）  
（7）抗原-抗体杂交

点评：本题考查基因工程和细胞工程，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．