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    14．图1表示含有目的基因D的DNA片段和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、
    BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点，分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．请回答下列问题：

    （1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由磷酸二酯键（填化学键名称）连接．
    （2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是平末端，其产物长度为537bp、790bp、661bp．
    （3）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有4种不同的DNA片段．
    （4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是BamHI．在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加了抗生素B的培养基进行培养．经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接．

    分析 根据图1分析，DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点，第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置．
    根据图2分析，若使用MboI会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamHI来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的受体细胞．

    解答 解：（1）一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由磷酸二酯键连接．
    （2）SmaⅠ识别的序列为GGGCCC，切割会产生平末端；图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点，第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置，从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度为537、790、661．
    （3）在杂合子体内含有基因D和基因d，基因D的序列中含有两个识别位点，经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段，综上，杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段．
    （4）能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌．因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，导致基因D不能正确表达．
    故答案为：
    （1）磷酸二酯键　
    （2）平　　537bp、790bp、661bp
    （3）4　　
    （4）BamH I  抗生素B　　同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接

    点评 本题考查单克隆抗体的制备、基因工程等相关知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    4．以下实验关于酸性条件的说法不正确的是（　　）
    A．在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，质量分数为8%的盐酸的作用是改变细胞膜的通透性，与DNA结合促进DNA水解
    B．在“探究酵母菌细胞呼吸的方式”实验中，将重铬酸钾溶解在体积分数为95%的浓硫酸溶液中来鉴定细胞呼吸产生的酒精
    C．在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中，将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸中配制成龙胆紫溶液作为染色体的染色剂
    D．在“低温诱导植物染色体数目的变化”实验中，体积分数为15%的盐酸溶液的作用是使细胞相互分离开来

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    5．回答下列有关遗传信息传递与表达的问题．
    天然存在的野生型质粒由于分子量大、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷，不能满足作为运载体的要求，因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建新质粒．
    假设下列三种质粒A、B、D，分别含有抗生素抗性基因r、s，及酶a、b的酶切位点．现需要通过基因工程大量表达目的基因M的产物．

    （1）组成目的基因M的基本单体有哪几种胞嘧啶脱氧核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、腺嘌呤脱氧核苷酸．切割目的基因的酶b称为限制性核酸内切酶．
    （2）作为基因工程的运载体，必须具备的条件是A、B、C、E．（多选）
    A．具有一个或多个限制酶切位点，以供外源基因插入其中
    B．具有标记基因，以检测重组DNA分子是否导入受体细胞
    C．能在宿主细胞中复制并稳定保存
    D．必须是细菌的质粒或噬菌体
    E．对宿主细胞无害
    （3）目的基因与运载体通过DNA连接酶连接形成重组DNA分子．
    （4）如果选择质粒A作为目的基因M的运载体，其缺陷是目的基因M可以插入酶b位点，可检测受体细胞中的抗性基因r而确定是否导入了质粒A，但无法检测是否导入了重组质粒A；如果选择质粒B作为目的基因M的运载体，其缺陷是目的基因M可以插入酶b位点，抗性基因s被破坏，无法检测是否导入了质粒B．
    为解决上述野生型质粒作为运载体的缺陷，进行人工构建新质粒．
    （5）如果用酶a分别切割质粒A、B，形成人工构建的新质粒（X），X是否是较理想的目的基因运载体，为什么？是．用酶a切割质粒A、B后，能形成具有一个抗性基因r和一个抗性基因s的X；用酶b切割目的基因M和X后形成重组质粒，含重组质粒的受体细胞可表现抗r抗性，但失去了抗s抗性；如果未导入质粒，则无任何抗性；如果导入的质粒未成功重组M，则表现抗r与抗s抗性；由此可筛选出受体细胞是否含有M重组质粒．如果用酶a分别切割质粒A、D，形成人工构建的新质粒（Y），Y是否是较理想的目的基因运载体，为什么？否．用酶a切割质粒A、B后，能形成具有一个抗性基因r和二个抗性基因s的Y，用酶b切割目的基因M和X后形成重组质粒，含重组质粒的受体细胞可表现抗r抗性，如果其中一个抗性基因s因导入目的基因M被破坏，而另一抗s基因自身环化，仍具抗性，会影响检测．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    2．下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的（　　）
    A．早期胚胎发育先后经历了卵裂期、桑葚胚、囊胚、孵化、原肠胚
    B．内细胞团将发育成胎盘和胎膜
    C．囊胚的滋养层细胞具有发育全能性
    D．原肠胚阶段的细胞暂时还没有出现细胞分化

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    9．如图1是基因型为AaBb（两对基因独立遗传）的某动物组织切片显微图象，图2的曲线表示该动物细胞中一条染色体上DNA的含量变化．请据图回答有关问题：

    （1）按分裂过程判断图1中标号的先后顺序是①→③→②，细胞②分裂结束后形成的细胞是卵细胞和极体．
    （2）细胞①与细胞③相比较，除细胞大小外，图中显示还有哪些明显区别？①含有同源染色体，③无同源染色体且染色体数目减半
    （3）通常情况下，该动物的基因A和基因a的分离发生在初级卵母（或①）细胞，细胞③正常分裂结束后能产生1种基因型的细胞，基因型是AB或Ab或aB或ab．
    （4）在图2中，a～b段DNA含量发生变化的原因是在间期完成DNA的复制．在图1①、②、③三图中，与b～c段相对应的细胞是图①和③．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    19．如图是DNA复制的图解，请据图回答下列问题．
    （1）独特的双螺旋结构为复制提供了精确的模板，碱基互补配对原则保证了复制能准确地进行．
    （2）一个有15N标记的DNA分子，放在没有标记的环境中，复制三次后标记的链占全部DNA单链的$\frac{1}{8}$．
    （3）一个DNA分子复制完毕后，新形成的 DNA 分子的子链B．
    A．是DNA母链的片段
    B．和DNA母链之一完全相同
    C．和DNA母链相同，但T被U所取代
    D．和DNA母链稍有不同．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    6．请回答下列有关微生物发酵的问题：
    （1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌．诱变及筛选过程如下：
    步骤一、将野生菌培养一段时间后，用一定强度的紫外线照射，目的是进行诱变处理．
    步骤二、制备选择培养基：在基本培养基的基础上，添加蔗糖（葡萄糖）和酸性物质加琼脂后灭菌，制成固体平板．添加以上物质的目的是保证发酵菌种的特定筛选环境．
    步骤三、将诱变处理后的菌液使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离纯化．
    （2）若要用酿造果酒装置酿造果醋，需要改变的环境条件是温度和氧气．当缺少糖源时，其优势菌种能将乙醇变为乙醛，再变为醋酸．
    （3）腐乳制作过程中起主要作用的微生物是毛霉，影响腐乳的风味和质量的因素是盐的用量、酒的用量、发酵温度、发酵时间等 （至少列举两项）．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    3．下列何种生态系统较为稳定（　　）
    A．食物链较长B．食物网中消费者较多
    C．生物种类单一，但数量较多D．食物网内各营养级较复杂

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    3．在对某种兔的种群密度的调查中，第一次捕获并标志46只，第二次捕获24只，其中有标志兔12只，则该种群的总数量为（　　）
    A．46B．24C．23D．92

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