Question

下图表示某抗虫水稻主要培育流程。请据图分析回答问题：

（1）过程①需要的工具酶有 。过程②常用 溶液处理土壤农杆菌，使其成为感受态。

过程④依据的生物学原理是 。

（2）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图

（图上标注了部分基因及部分限制酶作用位点）。请据图分析回答问题：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入 。

②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 两个基因（用图中基因字母符号表示），以保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于 的准确插入。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，结果是在含 的培养基上能够生长。

（3）限制酶Ⅱ识别的核苷酸序列及切割位点为-G↓ACGTC-（“↓”表示切割位点），请在答题纸提供的双链上标出切割DNA分子后形成的黏性末端上的碱基 。

Answer 1