Question

12．请回答有关基因工程的相关问题
（1）基因工程的核心步骤基因表达载体构建．
（2）将目的基因导入动物细胞中方法显微注射法．
（3）目的基因是否在受体细胞中的表达，分子水平的检测是抗原抗体杂交技术．
（4）标记基因的作用是筛选含目的基因的受体细胞（供重组DNA选择和鉴定）．
（5）农杆菌Ti质粒有T-DNA序列，能带着目的基因整合到受体细胞的染色体的DNA上．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．其中核心步骤是：基因表达载体构建．
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（3）检测目的基因是否在受体细胞中的表达，常用抗原抗体杂交技术．
（4）标记基因的作用是筛选含目的基因的受体细胞（供重组DNA选择和鉴定）．
（5）农杆菌Ti质粒有T-DNA序列，能带着目的基因整合到受体细胞的染色体的DNA上．
故答案为：
（1）基因表达载体构建
（2）显微注射法
（3）抗原抗体杂交技术
（4）筛选含目的基因的受体细胞（供重组DNA选择和鉴定）
（5）T-DNA

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．