Question

【题目】在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。

a链5′—G—G……T—C—3′　5′—G—G—OH(引物Ⅰ)

b链3′—C—C……A—G—5′　 (引物Ⅱ)

　　　95 ℃↓

5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′

　　　55 ℃↓

　　　　　　　　　　　5′—G—G—OH

5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′

　　 72 ℃↓

(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ，并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。__________________

(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。________

(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记，请分析循环一次后生成的DNA分子的特点：________，循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。

(4)PCR反应过程的前提条件是________，PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。

(5)在对样品DNA分析过程中发现，DNA掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是________。

Answer 1

【答案】 5′—G—A—OH(或HO—A—G—5′)

55 ℃↓

HO—A—G—5′ 5′—G—G—OH

5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′ 3′—C—C……A—G—5′ 5′—G—G……T—C—3′

5′—G—G……T—C—3′ 3′—C—C……A—G—5′ 每个DNA分子各有一条链含32P 1/2n DNA解旋 热变性 蛋白酶

【解析】试题分析：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。其过程为：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

（1）由图可知，引物Ⅱ为5’-G-A-OH。

（2）循环一次后生成的DNA分子如下：。

（3）若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记，根据DNA半保留复制特点可知，循环一次后，每个DNA分子各有一条链含32P，循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为2/2n+1=1/2n。

（4）PCR反应过程的前提条件是DNA解旋，PCR技术利用DNA的热变性原理解决了这个问题。

（5）在对样品DNA进行分析的过程中发现，DNA掺杂着一些组蛋白，根据酶的专一性原理，要去除这些组蛋白可加入蛋白酶。