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【题目】下图示叶绿体色素的提取和分离实验的部分材料和用具,据图回答(注:A、B、C为三种化学物质):

(1)图中步骤①加入研钵内的物质:A物质是5 mL的______,用于溶解色素;B是二氧化硅少许,作用是_______;C是少许________,作用是___________

(2)图中步骤③画滤液细线的要求是________并且干燥后重复数次。

(3)图中步骤④中关键应注意________

(4)色素层析后,从层析端开始,四种色素依次是__________________________

(5)在叶绿体色素的提取和分离实验中,收集到的滤液绿色过浅,其原因可能是____(多选)。

①未加SiO2,研磨不充分

②一次加入大量的无水酒精提取

③使用放置数天的菠菜叶

【答案】无水乙醇 研磨充分 碳酸钙 防止色素被破坏 细、齐、直 滤液细线不能浸入层析液中 叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 ①②③

【解析】

(1)研磨时需要加入3种物质:10 mL无水乙醇,作用是溶解色素;二氧化硅可以增大摩擦力,使细胞和叶绿体破碎;细胞研磨破碎后,会溢出有机酸,为防止叶绿素中的镁被氢取代,破坏叶绿素,研磨时需加入少许碳酸钙中和有机酸。

(2)过滤研磨液时,漏斗基部不能用滤纸,因为色素可吸附在滤纸上。一般用单层尼龙布或棉花来过滤。

(3)剪去两角的作用是防止两边色素扩散过快。画滤液细线的要求是细、齐、直。

(4)层析时的关键技术是不能让层析液没及滤液细线,否则,滤液细线会被层析液溶解,不能分离。4种色素溶于层析液中,因溶解度的差异,造成在滤纸条上扩散速度不同,从而达到分离的目的。由于层析液有毒,而且可以挥发,所以要加盖。色素带的宽度是由各种色素含量不同造成的,含量越多,色素带越宽,一般植物叶片中叶绿素a含量最多,所以叶绿素a色素带最宽。扩散速度最快的是胡萝卜素,在色素带的最上一层。

(1)研磨时需要加入3种物质:10 mL无水乙醇,作用是溶解色素;二氧化硅可以增大摩擦力,使细胞和叶绿体破碎;细胞研磨破碎后,会溢出有机酸,为防止叶绿素中的镁被氢取代,破坏叶绿素,研磨时需加入少许碳酸钙中和有机酸。

(2)图中步骤③画滤液细线的要求是细、齐、直,并且干燥后重复数次。

(3)层析时的关键技术是不能让层析液没及滤液细线,否则,滤液细线会被层析液溶解,不能分离。

4)色素层析后,从层析端开始,四种色素依次是叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素。
5)在叶绿体色素的提取和分离实验中,收集到的滤液绿色过浅,其原因可能是:

未加石英砂,导致研磨不充分,使色素的提取量减少,①正确。

一次加入大量的无水酒精,使色素提取液浓度降低,②正确。

放置数天的菠菜叶叶片发黄,叶绿素含量减少,提取量也会减少,③正确。

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