根据基因工程的有关知识.回答下列问题:(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段.其末端类型有黏性末端和平末端．(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图:为使运载体与目的基因相连.含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外.还可用另一种限制性内切酶切割.该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同．(3)按其来源不同.基因工程中� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

9．根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有黏性末端和平末端．
（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同．
（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两项，即E•coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶．
（4）反转录作用的模板是mRNA（或RNA）．
（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱．

分析基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶，连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．

解答解：（1）经限制性核酸内切酶切割后能形成两种类型的末端，即平末端和黏性末端．
（2）为了便于相连，两种不同限制酶切割之后所产生的黏性末端必须相同．
（3）DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（4）反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA．
（5）当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca²⁺处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒．而未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱．
故答案为：
（1）黏性末端平末端
（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同
（3）T₄
（4）mRNA（或RNA）
（5）吸收质粒（外源DNA）的能力极弱

点评本题考查基因工程的相关知识，重点考查基因工程的工具，只要考生识记基因工程三种工具的相关知识即可，属于考纲识记层次的考查，这需要考生在平时的学习过程中构建相关知识网络结构．

练习册系列答案

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