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    6．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．请回答下列有关问题：
    （1）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．洗涤红细胞时要用生理盐水（填溶液）反复洗涤、离心．要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入蒸馏水和甲苯．
    （2）得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去去除样品中相对分子质量较小的杂质．
    （3）然后通过凝胶色谱法（填方法）将样品进一步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（填方法）．

    分析 血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白．（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳．

    解答 解：（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固．样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步．洗涤红细胞时要用生理盐水反复洗涤、离心．要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入蒸馏水和甲苯．
    （2）透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白，透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内．
    （3）样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去．使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳．
    故答案为：
    （1）防止血液凝固  生理盐水　蒸馏水和甲苯
    （2）去除样品中相对分子质量较小的杂质
    （3）凝胶色谱法    SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

    点评 本题主要考查血红蛋白的提取和分离过程，意在强化学生对相关实验操作流程的识记、理解与运用．

    练习册系列答案
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    14．为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂（　　）
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    A．3、1、2、4B．3、1、4、2C．4、2、1、3D．2、4、3、1

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    18．下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是（　　）
    A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面的杂蛋白
    B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质
    C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
    D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构

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