Question

【题目】多环芳香烃（PAHs）是一类高毒性有机污染物，由于具有致癌性和致突变性而受到关注。实验小组从土壤中分离出能降解PAHs的细菌，并对其进行培养和计数。请回答下列问题:

（1）实验小组从富含PAHs的土壤中取样后，放置在以PAHs为唯一碳源的培养基上培养，其目的是________________________________。

（2）将PAHs降解菌的菌液稀释105倍后取0.1mL分别涂布在3个平板中，经培养，3个平板上的菌落数分别是79个、57个和41个，则样液中的活菌数是_________个/mL。也可以在显微镜下采用__________直接计数的方法统计样液中PAHs降解菌的数量。

（3）若采用平板划线法分离样液中的PAHs降解菌，操作时，接种环通过____________灭菌。在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液不宜过多，其原因是____________________________________。示意图A和B中，图____________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）若某一实验组平板上菌落的平均数为201个，而空白对照组的1个平板上出现了3个菌落，该结果说明这次实验可能出现了____________________________。

Answer 1

【答案】 增加PAHs分解菌的浓度，以确保能从样品中分离得到目的菌 5.9×107 血细胞计数板 灼烧 菌液过多会出现积液，导致菌体堆积而不能获得由单个细菌形成的单菌落 B 杂菌污染

【解析】试题分析：选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。检测土壤中细菌总数，可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数。用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。据图分析，图A表示的接种方法是平板划线法，图B表示的接种方法是稀释涂布平板法。

（1）该实验的目的是从土壤中分离出能降解PAHs的细菌，因此实验小组从富含PAHs的土壤中取样后，要放置在以PAHs为唯一碳源的培养基上培养，以增加PAHs分解菌的浓度，确保能从样品中分离得到目的菌。

（2）已知PAHs降解菌的菌液稀释了105倍，体积是0.1mL，三个平板上的菌落数分别是79个、57个和41个，则样液中的活菌数（79+57+41）÷3÷0.1×105=5.9×107个/mL。微生物计数也可以直接用血细胞计数板。

（3）平板划线法分离样液中的PAHs降解菌时，接种环应该用灼烧的方法灭菌；在涂布平板时，菌液过多会出现积液，导致菌体堆积而不能获得由单个细菌形成的单菌落。据图分析，图A表示的是平板划线法接种培养后得到的结果；图B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）若某一实验组平板上菌落的平均数为201个，而空白对照组的1个平板上出现了3个菌落，说明这次实验可能出现了杂菌污染。