Question

I.近期，思念、三全、湾仔码头等企业生产的速冻食品相继检出金黄色葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众的普遍关注。请回答下列问题：

(1)某小组欲检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌。经查资料：葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请完成下列实验

步骤：

①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节___________，分装到锥形瓶后___________，在无菌状态下加入卵黄液（100 mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀，立即倒平板。

②接种：取待检果汁2.5mL加入到22.5 mL的灭菌生理盐水中，制成接种样液。

实验组：将接种样液用___________法接种在含卵黄的固体培养基上。

对照组：将________用同样的方法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照。

将上述接种后的培养皿同时放在36 ⁰C的恒温箱中培养48h

③观察：观察培养基表面 _______________________________________________________

(2)葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl,所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl可以将它分离出来。此培养基属于___________ 培养基。

(3)要统计每克果汁样品中活菌数目，宜采用___________法接种，根据果汁样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

Ⅱ．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤：

(1)分别配置_____________的培养基和__________的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b备用；

(2)分别向A、B培养基接种___________；

(3)把接种后的培养基放在恒温箱中3d～4d；

(4)从A、B培养基上生长的菌落中挑取生长良好的菌株，分别接种到__________中；

(5)____________________________________________________________________________。

Answer 1

（除注明外,每空1分,共15分）

I.(1)①pH     灭菌    ②平板划线    灭菌生理盐水

③是否出现周围有乳浊环的菌落

(2)选择             (3)稀释涂布平板      菌落数目

Ⅱ．(1)无氮（或不含氮和青霉素）      加青霉素（或加青霉素和氮）

(2)混有两种菌的样品(4)a、b培养基

(5)把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d