Question

【题目】研究小组为了从土壤中筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基，将某土壤稀释液涂布接种一个平板培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图）。为研究其分解淀粉的能力，测量菌落和透明圈直径（如下表）：

菌种	菌落直径（mm）	透明圈直径(mm)
细菌Ⅰ	5．1	11．2
细菌Ⅱ	8．1	13．0

（1）上图所示接种微生物的工具是_______________，图中菌落数_________（填“可以”或“不可以”）作为淀粉分解菌的计数结果，原因是______________。

（2）测量时应__________（填“打开皿盖测量”“直接在皿盖上测量”或“直接在皿底测量”）。结合表中数据分析得到，分解淀粉能力最强的菌种是_________。

（3）以淀粉为原料釆用固定化技术生产葡萄糖，一般选择固定化酶，而不选择固定化细胞，理由是____________________________。

Answer 1

【答案】涂布器 不可以 同一土壤稀释液浓度下需涂布三个平板，以三个平板上菌落数的平均值作为统计结果；且为了保证结果准确，一般选择菌落在30～300的平板进行计数。 直接在皿底测量 细菌Ⅰ 固定化酶技术，酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以反复利用；固定化细胞技术，固定后的细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降（淀粉是大分子物质，难以自由通过细胞膜使催化反应受限）

【解析】

1、营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）由上图所示可知，接种该微生物的方法是稀释涂布平板法，所用的工具是涂布器。图中菌落数不可以作为淀粉分解菌的计数结果，原因是同一土壤稀释液浓度下需涂布三个平板，以三个平板上菌落数的平均值作为统计结果；且为了保证结果准确，一般选择菌落在30～300的平板进行计数。

（2）为避免杂菌污染，要测量菌落和透明圈直径应直接在皿底测量。由表中数据分析可知，细菌I的H/C值（周围透明圈直径和菌落直径的比值）最大，说明其分解淀粉能力最强。

（3）以淀粉为原料釆用固定化技术生产葡萄糖，一般选择固定化酶，而不选择固定化细胞，理由是固定化酶技术中酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以反复利用；而固定化细胞技术中固定后的细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降。