Question

【题目】运用所学知识回答下列问题：
将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如如图所示（注：农杆菌中Ti质粒上只有T﹣DNA片段能转移到植物细胞中）．

（1）过程①需用同种酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用培养基．
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是 ．
（3）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是 ． 种植转基因抗虫棉能减少的使用，以减轻环境污染．
（4）已知IgG抗体能消除狂犬病病毒．特异性IgG抗体获取也可用单克隆抗体制备法，下面是单克隆抗体的制备过程示意图，请回答下列问题．

①从小鼠的脾脏中取得B淋巴细胞之前，给小鼠注射的物质A是 ．
②动物细胞融合除了采用植物原生质体融合常用的诱导方法外，还可以采用 ．
③B过程的目的是 ．
④单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 ．

Answer 1

【答案】
（1）限制性核酸内切酶,选择
（2）T﹣DNA,筛选获得T﹣DNA片段的植物细胞
（3）投放棉铃虫,农药
（4）狂犬病病毒（抗原）,灭活的病毒,筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞,特异性强,灵敏度高,可大量制备
【解析】解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，为了获得相同的黏性末端，需用同种限制性核酸内切酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用选择培养基．（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让T﹣DNA进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，筛选获得T﹣DNA片段的植物细胞．（3）检验转基因棉的抗虫性状，常用个体水平进行鉴定，即投放棉铃虫．种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染．（4）①制备单克隆抗体需要获得已免疫的B淋巴细胞，因此需要给小鼠注射狂犬病病毒（抗原）．②植物原生质体融合的方法包括物理法和化学法，动物细胞融合除了这两种诱导方法外，还可以采用灭活的病毒．③B过程的目的是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞．④单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备．

所以答案是：（1）限制性核酸内切酶 选择 （2）T﹣DNA 筛选获得T﹣DNA片段的植物细胞（3）投放棉铃虫 农药（4）①狂犬病病毒（抗原） ②灭活的病毒 ③筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞④特异性强，灵敏度高，可大量制备

【考点精析】认真审题，首先需要了解基因工程的原理及技术(基因工程的原理是利用DNA重组技术)，还要掌握单克隆抗体的制备(对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞；然后对它进行克隆化培养和抗体检测；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体)的相关知识才是答题的关键．