Question

10．研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了如下操作．请回答：
（1）取样：在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要灭菌．
（2）选择培养：次步骤的目的是增加脱硫细菌浓度．
（3）驯化脱硫细菌：将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入SO₂气体，驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO₂的时间，与此同时逐步降低培养基的PH．由此分离得到的脱硫细菌具有耐受SO₂和适应酸性环境能力．
（4）培养与观察：培养一段时间后，可选取脱硫细菌菌落数目稳定时的记录作为结果．
（5）培养大量的目的菌用于生产，研究人员需连续取样进行计数，计数方法一般有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法．当用前者进行计数时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌．统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数．通常情况下，用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低．

Answer 1

分析 纯化细菌：
（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落．
（2）微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理．
（2）选择培养，脱硫细菌能存活，并能增殖，此步骤的目的是增加脱硫细菌浓度．
（3）延长通SO₂的时间，与此同时逐步降低培养基的PH．不具有耐受SO₂的不能存活．由此分离得到的脱硫细菌具有耐受SO₂和适应酸性环境能力．
（4）培养一段时间后，可选取脱硫细菌菌落数目稳定时的记录作为结果．
（5）研究人员需对目的菌连续取样进行计数，计数方法一般有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法．当用稀释涂布平板法是指将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数．用稀释涂布平板计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低．这是因为培养过程中两个或多个细胞可能生长在一起形成一个菌落．
故答案为：
（1）灭菌 
（2）脱硫细菌 
（3）耐受 SO₂    适应酸性环境
（4）菌落数目
（5）显微镜直接计数       一个活菌      低

点评 本题考微生物的培养和分离，要求考生识记微生物培养和分离的方法，能结合所学的知识准确答题．