Question

【题目】请回答基因工程相关问题：

（1）基因工程的四个基本操作步骤：获取目的基因、_______、将目的基因导入受体细胞、目的基因检测与鉴定；获取目的基因的两条途径为______和_______。

（2）在基因表达载体中，启动子是_______聚合酶识别和结合的部位。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是________；在获得转基因奶牛时，将基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是________。

（3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有__________种环状DNA分子，它们分别是____________。

Answer 1

【答案】基因表达载体的构建 从生物材料中分离 人工合成 RNA 除去内含子 显微注射法 3 运载体自连、目的基因片段自连、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子

【解析】

该题主要考察了基因工程的基本过程，基因工程包含四个步骤，分别是获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因检测与鉴定。真核细胞中的基因和原核细胞中的基因差别在内含子的表达上，启动子是进行转录开始的起点。

（1）基因工程的四步基本操作为获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因检测与鉴定；获取目的基因的两个方法分别为从目标生物体内获取，或人工合成；

（2）启动子是转录开始的信号位点，因此是RNA聚合酶的结合位点；由于原核细胞中缺少对内含子转录出的片段进行修饰的能力，所以需要在基因中去除内含子；动物细胞进行基因表达载体的导入时，常常选择显微注射法；

（3）同一种限制酶切割基因片段后得到的黏性末端相同，所以加入DNA连接酶后，相同的黏性末端都有可能连接到一起，因此可能产生三种连接情况，分别为运载体自连、目的基因片段自连、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子。