Question

【题目】我国曾经发生过因“非典型性肺炎”而死亡的病例，经研究发现，该病是由SARS病毒（一种RNA病毒）感染所引起的疾病．SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体．某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作，其简要的操作流程如图：
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 ．
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制酶和酶，后者的作用是将用限制性核酸内切酶切割的S蛋白基因和连接起来．
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大肠杆菌中不能 ， 也不能 ．
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用与SARS康复病人血清进行抗原﹣抗体特异性反应实验，从而得出结论．
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列（填“相同”或“不同”），根本原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）反转录
（2）DNA连接；载体
（3）复制；合成S蛋白基因的mRNA
（4）大肠杆菌中表达的S蛋白
（5）相同；表达蛋白质所用的基因相同
【解析】解：（1）实验步骤①RNA控制DNA合成，该过程是反（逆）转录．（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B，必须使用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，形成相同的粘性末端，再用DNA连接酶，形成重组DNA．（3）如果省略步骤③基因表达载体的构建，而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能进行复制，也不能进行以其为模板合成S基因的mRNA（或转录）．（4）步骤④检测所表达的S蛋白的特征，可用大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清进行抗原﹣抗体特异性反应实验，如果能够特异性的结合，说明表达成功．（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列相同，根本原因是表达蛋白质所用的目的基因相同． 所以答案是：（1）反转录；（2）DNA连接；载体；（3）复制；合成S蛋白基因的mRNA；（4）大肠杆菌中表达的S蛋白；（5）相同；表达蛋白质所用的基因相同
【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术才能正确解答此题．